文档介绍：血红蛋白提取
课题背景: 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分。负责血液中O2和CO2的运输。

两部分组成。
血细胞中_______细胞数量最多，该细
胞中含量最高的化合物是_________
血浆
血细胞
红
血红蛋白
2条α-肽链
2条β-肽链
亚铁血红素
________和__________
构成的，其中每个亚基中都含有一个能与O2和CO2结合的__________基团
故，本课题可选用猪、牛等其他脊椎动物的血液来分离血红蛋白!
∴血红蛋白呈红色！
一、基础知识
(一)蛋白质提取与分离的依据---根据蛋白质各种特性的差异：
、大小

凝胶色谱法
凝胶电泳法
(二)蛋白质提取与分离的方法:
（1）原理：
（2）材料：凝胶
大分子通过多孔凝胶颗粒的____,路程__,移动__
小分子穿过多孔凝胶颗粒的____,路程__,移动__
1 、凝胶色谱法(分配色谱法)
间隙
内部
短
长
快
慢
根据相对分子质量的大小
分离蛋白质
凝胶：微小的多孔球体，内部有许多
贯穿的通道。
化学本质多为：多糖类化合物，如：
葡聚糖或琼脂糖。
混合物
上柱
洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
凝胶色谱柱
（层析柱）
（3）凝胶色谱法分离过程
凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示:
如H2CO3/NaHCO3，NaH2PO4/Na2HPO4等
－－洗脱液
抵制外界酸和碱对溶液pH的影响，在一定范围内保持 pH稳定。
（4）缓冲溶液
◆作用：
◆配制：
通常由1－2种缓冲剂溶解于水中配制而成
(2)电泳的原理：
2、凝胶电泳法
(1)电泳的概念
注：带电粒子向着_________________的电极移动。
与其所带电荷相反
带电粒子在电场作用下发生迁移的过程
利用待分离样品中各分子带电性质的差异，分子本身的大小和形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现各种分子的分离
注：影响蛋白质分子运动速度的因素：
√
√
√
√
√
思考：蛋白质为什么带有电荷？
许多生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团会带上正电或负电