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免疫荧光技术应用临床科学应用.ppt

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免疫荧光技术应用临床科学应用.ppt

上传人:gumumeiying 2021/9/12 文件大小:1.05 MB

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免疫荧光技术应用临床科学应用.ppt

文档介绍

文档介绍:免疫荧光技术应用临床科学应用
随着人们生活水平和意识的不断提
高,各种因素的影响,近年来每31个人
中就有一个人在受到自身免疫性疾病的
折磨,临床表现复杂,不易早期发现。
自身免疫性疾病涉及多学科
(风湿免疫科、内分泌科、血液科、妇产科、皮肤科、肾病科、消化科等等)
自身免疫性疾病涉及多病种
(混合结缔组织病、系统性红斑狼疮、磷脂综合症、原发性系
统性血管炎、韦格纳肉芽肿、坏死性新月体肾小球肾炎、显
微多动脉炎****惯性流产、干燥综合征、皮肌炎、多肌炎、
原发性胆汁性肝硬化、原发性胆管炎等等)
自身免疫性疾病的共同特征:
患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在,患者组织器官的病理特征为免疫炎症,用相同抗原在某些动物实验中可复制出相似的疾病模型,多数病因不明,疾病有重叠现象,即一个病人可同时患一种以上自身免疫病,病程一般较长,多迁延为慢性,有遗传倾向。
鉴于自身免疫性疾病的共同特征,通过检测自身抗体可以有效准确的诊断自身免疫性疾病,为临床提供高效准确的诊断依据。
自身抗体检测的开展,不仅让我院在自身免疫性疾病
诊断治疗上有很大的提高,还可为陇东南地区400万人口提
供更准确、更专业的自身免疫性疾病诊断服务。节省患者去
外院检测诊断所花费的时间和费用,使我院在整个地区具有
一定的影响力,也会为医院带来可观的经济效益。鉴于此,
我院完全有必要应用间接免疫荧光技术开展自身抗体项目的
检测。
2
酶联免疫吸附法(ELISA)
1
间接免疫荧光法(IFA Indirect Fluorescent Assay )
3
免疫印迹法(IB)Westernblot
LIA
4
其它:IDA、RIA等
间接免疫荧光法实验原理
细胞、组织切片或纯化的、生化性质明确的物质均可作为检测自身抗体或病原体抗体的抗原基质。
如标本为阳性,已稀释血清中的特异性抗体将与包被在固相上的抗原结合。
第二步,已结合的抗体与荧光素标记的抗人抗体结合,然后在荧光显微镜下观察结果。
阳性标本经系列稀释后可测出其滴度。最适稀释因子为(10的平方根),这样,每隔一步就出现一个10的整数倍数(1:10、1:32、1:100、1:320、1:1000、 1:3200, 1:10000等
间接免疫荧光法检测的特点
特异性高:阳性与阴性标本的荧光强度差别明显。每种已结合的抗体在相应抗原的位置产生典型的荧光模型。
基质中抗原谱完整,可检测多种抗体,并且检出率高。
可在一种生物基质上同时检测多种抗不同生化特性抗原的抗体。
当酶免试剂所需要的抗原难以制备或无法获得时,可选择间接免疫荧光法。
自身抗体检测的标准和最经典的实验方法是间接免疫荧光检测法(IFA)。
需要荧光显微镜。
操作者需要一定的专业知识。
操作者需要一定的工作经验。
显微镜下的结果判断为综合知识的体现,到目前为止,尚没有任何仪器可取代人工读片。