文档介绍：会计学
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皮肤科免疫荧光技术
免疫荧光技术概述
原理
将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
分类
直接法：将荧光素标记的抗体与标本中的抗原直接结合进而荧光反应。
间接法：将荧光素标记的抗抗体与相应的特异性抗体抗原复合物反应，形成抗原-抗体-抗抗体复合物体系，进检测的一种特异性荧光反应。
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免疫荧光原理示意图
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临床常用荧光素染料
⑴异硫***酸荧光素（FITC）
λ吸=490--495nm 、λ发=520--530nm、黄绿色荧光
⑵四乙基罗丹明（RIB200）
λ吸=570nm、 λ发=595～600nm、呈橘红色荧光
⑶四***异硫***酸罗丹明（TRITC）
λ吸=550nm、 λ发=620nm、呈橙红色荧光
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皮肤直接免疫荧光检测
适应症：
非感染性大疱性皮肤病
天疱疮、类天疱疮、疱疹样皮炎、线状IgA大疱性皮病、获得性大疱性表皮松解等
结绨组织病：如红斑狼疮等
各种血管炎
皮肤肿瘤
某些感染性皮肤病
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皮肤间接免疫荧光检测
适应症：
血清中各种抗微生物抗体测定
如：梅毒螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、疱疹病毒等
血清中各种自身抗体的测定
系统性疾病：如红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病等
大疱性皮肤病：如天疱疮抗体等
糖尿病：如抗胰岛细胞抗体等
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操作方法及流程
放入生理盐水送检
手术取材
外观正常未受累皮肤
直径1-2mm带疱皮损
（米粒大小水疱）
直接荧光患者标本采集
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操作方法及流程
冰冻切片、染色、镜检
组织修材，成适合冰冻包埋块的大小
冰冻切片
抗原与荧光抗体结合
荧光显微镜下镜检及成像，打印报告
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操作方法及流程
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间接免疫荧光染色步骤
操作方法及流程
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