文档介绍：同时测量阴离子,阳离子:方法验证摘要: 常规方法同时检测阴阳离子采用离子色谱进行分析, 但费时费力而且无法测定未知物质。本文利用新型电喷雾式检测器与离子色谱相连同时分析阴阳离子, 并对分析方法进行了验证。结果表明, 不但灵敏度可低至毫微克水平, 而且方法可靠, 重现性好, 较之单独的离子色谱更是高效、快捷,适于推广。关键词: ICS-5000 , Corona CAD ,醋酸铵,阴离子,阳离子 1 前言同时测定阴离子和阳离子通常用离子色谱法通过一个电导检测器( ICCD )进行分析。这种技术往往需要明确的被分析物, 而且阳离子和阴离子, 必须分别的使用特定的平台测定。一个创新的方法是利用电喷雾使检测器( Corona CAD. ) 与离子色谱 ICS-5000 相连并选用高分子*** HILIC 柱,可将含量低至毫微克级的阴离子、阳离子在一次实验中同时测定且具有重现性。这种方法允许通过梯度优化检测条件, 使更多的分析物可在同一套仪器平台上测定,包括:阴离子,阳离子,氨基酸,有机酸,和很多药物活性物质( API ) 。为广大使用者提供了一种更快, 更经济的分析方法, 优化简单, 包括所有相关元件和流动相组成只需轻微的调整即可。 CAD 的灵敏度可检测出混合物中含有的 %的离子, 而大多数的混合物是在药物研发过程中需要根据检测结果进一步调整的,因此快速提供准确结果十分必要。本应用注解描述了常规的梯度法和验证结果的具体细节。图 1. 覆盖 8 个不同浓度( 800ppb — 100ppm;.8 - 1000 ng . )的铵离子或醋酸盐中离子。 2 材料与方法样品制备与分析下列六个盐都是预先备好的去离子水溶解的浓度为 10mg/mL :***铵,***化铵,硫酸铵,磷酸铵,醋酸钠,醋酸钾。取这些样品的部分混合,然后用 80/20 乙***/ 水稀释到大约以下的盐离子浓度:100 , 50, 25, , , , , μ g/mL 。额外的样品制备, 是用来测试的每一个目标离子的检测方法的准确性。化合物和进样浓度列于表 1。这8 点标准曲线和精确称量样品被转移到安捷伦的聚丙烯瓶。标样 4( . )在检测过程中进样 22 次,来检查重现性和中间分析准确性。在检测过程中流动相分别准备三次来检查的方法的适用性。方法参数仪器:离子色谱 ICS-5000 色谱柱: Sequant ZIC. - pHILIC; x 150 毫米, 5μm 柱温: 30℃进样体积: 10μl 流速: ml/min 流动相 A: 100 mM 的醋酸铵( ) ,甲醇,异丙醇,乙***( 15 v:5 v:20 v:60 v) 流动相 B: 30mM 醋酸铵( ) ,甲醇,异丙醇,乙***( 50 v:5 v:20 v:25 v) 梯度:表 2 Corona : 100pA 范围,无过滤器样本瓶:聚丙烯或认证的硼硅酸盐材质表 1. 方法的准确性,反离子测定结果的重复性表 2. 梯度参数 3 结果与讨论在图 1中,在8 个不同浓度点重复同一实验。得到的数据符合二阶多项式的拟合并在上柱8— 1000ng 符合线性拟合分别如图 2A 和 2B 所示。这种分析的准确性通过对有无机盐或包含反离子的有机化合物的比