文档介绍：NDM-1 检测方法- NDM-1 分子生物学检测方法
产KPC酶的肠杆菌科细菌耐药特点
黏菌素 /多粘菌素 敏感
MIC ≤2 µg/ml S
替加环素 可能敏感〔 MIC ≤2 µg/ml S; 4 µg/ml I; ≥8 µg/ml R〕
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NDM-1 的检测方法
NDM-1，即新德里金属β-内酰***酶-1型，是由细菌质粒上携带的blaNDM-1基因编码的。目前，国际上已有十余篇关于NDM-1的研究性文章或相关部门报揭发表。
由blaNDM-1编码产生的碳青霉烯酶及因此产生的对碳青霉烯类耐药性可以通过现有推荐使用的表型鉴定方法准确、可靠的鉴定出来[1]
[1] US CDC. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2021 Jun 25;59(24):750.
[2] Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2021 Dec;53(12):5046-54.
CLSI M100-S20及CLSI M100-S20-U中碳青霉烯类的折点
抗菌药物
纸片扩散法 (mm)
稀释法(mg/L)
M100-S20
M100-S20-U
M100-S20
M100-S20-U
S R
S R
S R
S R
多利培南
-
≥23 ≤19
-
≤1 ≥4
厄他培南
≥19 ≤15
≥23 ≤19
≤2 ≥8
≤ ≥1
亚***培南
≥16 ≤13
≥23 ≤19
≤4 ≥16
≤1 ≥4
美罗培南
≥16 ≤13
≥23 ≤19
≤4 ≥16
≤1 ≥4
〔一〕表型筛查试验
纸片扩散法：
美罗培南〔10ug〕或亚***培南〔10ug〕：
抑菌圈直径≤22mm
肉汤稀释法或Etest法
美罗培南或亚***培南:MIC≥2ug/ml
亚***培南适合于大肠埃希菌，克雷伯菌属，沙门菌属，肠杆菌属
变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属对亚***培南敏感性下降是由产碳青霉烯酶外的其他机制引起，因此对这些菌株尚未建立用亚***培南MIC法进行筛选和确认碳青霉烯酶，并且亚***培南纸片法对所有肠杆菌科碳青霉烯酶的筛查效果都不好
[1] Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2021 Dec;53(12):5046-54.
[2] Kumarasamy KK et al. Lancet Infect Dis. 2021 Sep;10(9):597-602.
〔二〕表型确证试验
纸片扩散法：
Etest法：
双纸片协同法：
改进霍奇试验(modified Hodge test)
自动化鉴定与药敏仪器
[1] Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2021 Dec;53(12):5046-54.
[2] Kumarasamy KK et al. Lancet Infect Dis. 2021 Sep;10(9):597-602.
〔二〕表型确证试验
纸片扩散法：亚***培南(10ug)/亚***培南(10ug)+ EDTA(500mM 10ul)复合纸片
结果判读：复合纸片比单药纸片抑菌环直径增大≥5mm
图：复合纸片法判定金属β-内酰***酶示意图
(左纸片：亚***培南/EDTA, 右纸片：亚***培南)
[1] Yong D et al. J Clin Microbiol. 2002 Oct;40(10):3798-801.
〔二〕表型确证试验
Etest法：
Etest® MBL (IP/IPI、MP/MPI)
结果判读：单药与复合制剂的MIC比值≥8
图：Etest MBL (IP/IPI)