文档介绍：第三军医大学
博士学位论文
体外诱导毛囊Bulge细胞向皮脂腺细胞定向分化的研究
姓名:符刚
申请学位级别:博士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:杨恬
20051101
论文作者签名:鍪论文作者签名::簋塑指导教师签名:盘丝日期::丝:竺第三军医大学研究生学位论文独创性声明第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书期:,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究秉承学校严谨的校风和科研作风,本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解第三军医大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第三军医大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为第三军医大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。日
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体外诱导毛囊赴蚱ぶ傧赴定向分化的研究摘要用;它能够抗氧化,特别是抗紫外线的侵袭,对保持皮肤的完整和功能正常存着重要的作用。皮脂腺细胞的发育分化过程十分复杂,包括细胞形态的改变和基因表达的变毛囊是皮肤重要的附属器官,具有周期性生长的特点。目前已知毛囊干细胞位于外根鞘的隆突芯恐っ髅襜细胞具有多向分化的能力,不仅能分化形成毛囊,还能够形成皮脂腺和表皮角朊细胞。由于表皮、毛囊和皮脂腺关系密切,,具有抗炎、抵抗外来微生物的作化。过氧化物酶体增殖物激活受体,在成脂细胞分化过程中起着关键的作用,它能有效促进脂质合成。在娜盅型中,与脂肪和皮脂腺细胞的分化尤其相关。是脂肪细胞分化过程中重要的调节因子,它可促使成纤维细胞或骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化。尽管多项证据表明皮脂腺的更新和维持来源于毛囊的赴牵两袢晕在体外实验中观察至细胞分化为皮脂腺细胞的直接证据。毛囊干细胞体外分离培养技术的相对滞后,影响了研究的进一步深入。我们在体外分离培养了毛囊赴并在一定的条件下诱导赴蚱ぶ傧赴ㄏ蚍只惫菇≒柿#过脂质体将其转染至赴校鄄焖詁细胞定向分化为皮脂腺过程中的作用。主要结果如下:⒚襜胞的分离培养及生物学特性的研究采用免疫组化及原位杂交技术,检测大鼠毛囊赴上赴砻姹曛疚锖分化标志物的表达情况,运用显微分离及酶消化法分离并培养大鼠毛囊赴观察培养的毛囊赴逋馍ぬ匦裕北冉狭瞬煌嘌逑刀詁细胞生物学特性的影响。结果发现:上赴砻姹曛疚颣的表达主要位于毛囊的区,而该区不表达毛囊上皮的细胞分化标志经酶消化后的毛囊织易贴壁,蠹从邢赴莱觯谺区向外扩展生长,旌笙赴鱿秩诤希第三军医大学博士学位论文
实验奠定了基础。庖咦榛峁⑾郑H竞蟮南赴泶颬聊蛋白,阳性信号本部分我们观察了大鼠毛囊赴谔逋庥盏蓟肪诚孪蚱ぶ傧赴ㄏ蚍只细胞在培养天细胞数量达峰值,以后细胞生长减慢,传代后细胞成克隆生长,生长良好,细胞形态均一,呈铺路石状,核浆比例大,表现出原始细胞形态的特征。免疫细胞化学检测,群集生长的毛囊赴泶颣,运用免疫荧光双标方法检测细胞整联蛋白和的表达,该干细胞强表达整联蛋白,而表达较弱。传代后及随着培养时间的延长,细胞的粜员泶镏鸾ゼ跞酰粜韵赴鸾ゼ少。鄄斓谝淮扪G錕嘌械腷细胞的生长曲线与含血清的培养基无明显差异,但是比较不同代次间赴寺⌒纬陕屎蚄阳性率,无血清组明显优于含血清的组。因此,对比传统的培养体系,本实验采用低钙无血清培养体系对保持赴纳镅匦愿S行А⑻逋庥盏济襜细胞向皮脂腺定向分化的初步研究的能力,体外分离培养大鼠毛囊赴缓笤谟盏寂嘌信嘌鄄煜赴分化情况。结果发现:饩迪驴梢怨鄄