文档介绍：网上辅导7(第13-15章)
第十三章维生素药物的分析
第一节维生素A的分析
一、结构与性质
维生素A的结构为具有共轭多烯侧链的环己烯,故具有许多立体异构体。
,易溶于有机溶剂。
,所以性质活泼,不稳定。易被氧化剂氧化,易被紫外光裂解。
,在紫外光区有强吸收,可用于鉴别和含量测定。
,产生不稳定的蓝色。二、鉴别试验维生素A的鉴别可用三氯化锑反应、紫外分光光度法和薄层色谱法等。
三、含量测定
(一)紫外分光光度法(重点、难点)
:维生素A在325~328nm的波长范围内具有最大吸收,可用于含量测定。但维生素A原料中常混有其他杂质,干扰维生素A的测定。
为消除非维生素A物质引起的无关吸收所引入的测定误差,以求得维生素A的真实含量,建立了三点校正法。即在规定条件下用校正公式计算吸收度Amax(校正)后,再进行计算。可消除无关吸收,测得维生素A的真实含量。
,根据校正公式计算吸收度A校正值后,再计算含量,故本法称为“三点校正法”。其原理主要基于以下两点:
(1)杂质的无关吸收在310~340nm的波长范围内几乎呈一条直线,且随波长的增大吸收度下降。
(2)物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸收曲线上,各波长处的吸收度是维生素A与杂质吸收度的代数和,因而吸收曲线也是二者吸收的叠加。
3. 波长选择三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处(即λ1);其它两点选择在λ1的两侧各选一点(λ2和λ3)。
(1)第一法(等波长差法):使λ3-λl=λl-λ2。中国药典规定,测定维生素A
醋酸酯时,λl=328nm,λ2=316nm,λ3=340nm,Δλ=12nm。
(2)第二法(等吸收比法):使==6/7。中国药典规定,测定维生素A醇时,λl=325nm,λ2=310nm,λ3=334nm。
:维生素A测定法有“第一法”和“第二法”两种方法(中国药典2000年版)。
(1)第一法(直接测定法,适用于纯度高的维生素A醋酸酯)
(2)第二法(皂化法,适用于维生素A醇)
第一法(直接测定法,适用于纯度高的维生素A醋酸酯)
(1)测定方法:供试品适量→精密称定→环己烷溶解→定量稀释制成每1ml中含9~15单位的溶液→照分光光度法→测定其吸收峰的波长→分别在300、316、328、340和360nm波长处测定吸收度(如不在326~329nm之间,则改用第二法测定)→计算各波长处的吸收度与波长328nm处吸收度的比值和波长328nm处的值。
(2)含量计算:
每1g供试品中含有的维生素A的单位= (328nm)×1900
(3)校正步骤:
①如果吸收峰波长在326~329nm之间,且所测得各波长比值不超过表13-,则用A328(实测)计算。
②如果吸收峰波长在326~329nm之间,但所测得的各波长吸收度比值超过表13-,应按下式求出校正后的吸收度,并计算校正吸收度与实测吸收度的差值对实测吸收度的百分率(简称差值百分率)。
A328(校正)=(2A 328-A 316-A 340)
③如差值百分率在- %~ + %之间,则不用校正吸收度,仍以实测吸收度计算含量。
④如差值百分率在-15%~ -3 %之间,则以校正吸收度计算含量。
⑤如差值百分率<-15%或>+3 %,则供试品须按第二法测定。
(4)生物效价和换算因数:
1g维生素A醋酸酯相当的单位数是:
∵维生素A醋酸酯的吸收系数为1530
∴换算因数
应用示例:中国药典收载的维生素A胶丸、维生素AD胶丸和维生素AD滴剂等均采用本法测定含量。
维生素AD胶丸的测定:(,标示量每丸含维生素A 10 000单位),置10ml烧杯中,加环己烷溶解并定量转移至50ml量瓶中,用环己烷稀释至刻度,摇匀;精密量取2ml,置另一50ml量瓶中,用环己烷稀释至刻度,摇匀。以环己烷为空白,测得最大吸收波长为328nm,并分别于300、316、328、340和360nm的波长处测得吸收度如下,求胶丸中维生素A占标示量的百分含量?
波长(nm)
300
316
328
340
360
测得吸收度(A)
解:
(1)计算各波长处的吸收度与328n