文档介绍：.
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一、液-固色谱原理
液-固色谱是基于吸附和溶解性质的别离技术，柱色谱属于液-固吸附色谱。
当混合物溶液加在固定相上，固体外表借各种分子间力〔包括范德华力和氢键〕作用于混合物中各组分，以不同的作用强度被吸附在固体外表。
由于吸附剂对各组分的吸附能力不同，当流动相流过固体外表时，混合物各组分在液-固两相间分配。吸附牢固的组分在流动相分配少，吸附弱的组分在流动相分配多。流动相流过时各组分会以不同的速率向下移动，吸附弱的组分以较快的速率向下移动。随着流动相的移动，在新接触的固定相外表上又依这种吸附-溶解过程进行新的分配，新鲜流动相流过已趋平衡的固定相外表时也重复这一过程，结果是吸附弱的组分随着流动相移动在前面，吸附强的组分移动在后面，吸附特别强的组分甚至会不随流动相移动，各种化合物在色谱柱中形成带状分布，实现混合物的别离。
 
二、柱色谱别离条件
〔1〕 固定相选择
柱色谱使用的固定相材料又称吸附剂。
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吸附剂对有机物的吸附作用有多种形式。以氧化铝作为固定相时，非极性或弱极性有机物只有范德华力与固定相作用，吸附较弱；极性有机物同固定相之间可能有偶竭力或氢键作用，有时还有成盐作用。这些作用的强度依次为：
成盐作用> 配位作用> 氢键作用> 偶极作用> 范德华力作用。有机物的极性越强，在氧化铝上的吸附越强。
常用吸附剂有氧化铝、硅胶、活性炭等〔表1〕。
 
色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。酸性氧化铝pH约为4～，用于别离羧酸、氨基酸等酸性物质；，用于别离中性物质，应用最广；碱性氧化铝pH为9～10，用于别离生物碱、***和其它碱性化合物等。
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吸附剂的活性与其含水量有关。含水量越低，活性越高。脱水的中性氧化铝称为活性氧化铝。
硅胶是中性的吸附剂，可用于别离各种有机物，是应用最为广泛的固定相材料之一。
活性炭常用于别离极性较弱或非极性有机物。
吸附剂的粒度越小，比外表越大，别离效果越明显，但流动相流过越慢，有时会产生别离带的在重叠，适得其反。
〔2〕流动相选择
色谱别离使用的流动相又称展开剂。
展开剂对于选定了固定相的色谱别离有重要的影响。 
在色谱别离过程中混合物中各组分在吸附剂和展开剂之间发生吸附-溶解分配，强极性展开剂对极性大的有机物溶解的多，弱极性或非极性展开剂对极性小的有机物溶解的多，随展开剂的流过不同极性的有机物以不同的次序形成别离带。
在氧化铝柱中，选择适当极性的展开剂能使各种有机物按先弱后强的极性顺序形成别离带，流出色谱柱。
当一种溶剂不能实现很好的别离时，选择使用不同极性的溶剂分级洗脱。如一种溶剂作为展开剂只洗脱了混合物中一种化合物，对其它组分不能展开洗脱，需换一种极性更大的溶剂进行第二次洗脱。这样分次用不同的展开剂可以将各组分别离。
三、柱色谱别离操作
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〔1〕柱色谱装置
柱色谱装置包括色谱柱、滴液漏斗、接受瓶。
色谱柱有玻璃制的和有机玻璃制的，后者只用于水做展开剂的场合。色谱柱下端配有旋塞，色谱柱的长径比应不小于7～8:1。
〔2〕别离操作
① 装柱：
色谱柱的装填有干装和湿装两种方法。
干装时，先在柱底塞上少许玻璃纤维，再参加一些细粒石英砂，然后