文档介绍：仪器分析液相色谱法
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简介
最早发明的色谱法（俄国植物学家分离植物色素）
直到1960年代后期才普及，因为受到材料和相应技术的限制
实现了高速化，HPLC（high performance liquid chromatography or high pressure LC)
和GC相比
液体流动相选择余地大，可以用以控制和改进分离条件
通常在常温下进行
对象范围大（80%的有机物）
目前运用最广最多的色谱
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1．高效液相色谱法与经典液相色谱法
高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百倍。由于经典色谱是重力加料，流出速度极慢；而高效液相色谱配备了高压输液设备，流速最高可达 103cm·min-，7个组分只需1min就可完成。对氨基酸分离，用经典色谱法，柱长约170cm，，流动相速度为30cm3·h-1，需用20多小时才能分离出20种氨基酸；而用高效液相色谱法，只需1h之内即可完成。又如用25cm×－ODS(5μ)的柱，采用梯度洗脱，.
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2．高效液相色谱法与气相色谱法
（1）气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物，它们仅占有机物总数的20％。对于占有机物总数近80％的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质，目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。
(2)气相色谱采用流动相是惰性气体，它对组分没有亲和力，即不产生相互作用力，仅起运载作用。而高效液相色谱法中流动相可选用不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产生一定亲和力，并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因此，流动相对分离起很大作用，相当于增加了一个控制和改进分离条件的参数，这为选择最佳分离条件提供了极大方便。
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(3)气相色谱一般都在较高温度下进行的，而高效液相色谱法则经常可在室温条件下工作。
总之，高效液相色谱法是吸取了气相色谱与经典液相色谱优点，并用现代化手段加以改进，因此得到迅猛的发展。目前高效液相色谱法已被广泛应用于分析对生物学和医药上有重大意义的大分子物质，例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、高聚物、染料及药物等物质的分离和分析。
高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵，操作严格，这是它的主要缺点。
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HPLC仪器
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HPLC和经典LC
Classic LC：重力洗脱
HPLC：高压、高效、高速
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HPLC仪器组成
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HPLC——高压输液系统
高压输液泵
主要部件之一，压力：150～350×105 Pa。
为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性
梯度淋洗装置
特别需要用于组分复杂、容量因子宽的样品
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HPLC——进样装置
流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，其结构如图所示：
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