文档介绍：中国医科大学
硕士学位论文
口服Ag85A DNA疫苗在小鼠肠道局部的表达
姓名:徐佳
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:吕昌龙
20080401
馹猒●馹●!!猒馹—●●馹馹●●—●——————————————一。·英文缩略语·派氏淋巴结滤泡相关上皮抗原复合体肠上皮内淋巴细胞赴芴卡介苗白细胞介素干扰素肿瘤坏死因子树突状细胞转化生长因子狟疭———猋猀
耋喜姜嘉薹耋蠊㈣徐俘日期:鲨墨:竺:二三期:型壁:￡:;中国医科大学研究生学位论文独创性声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C内容除外圆捎糜坝⑺跤』蚱渌侄伪4媛畚摹指导教师签名:表示谢意。日
口服呙缭谛∈蟪Φ谰植康谋泶·中文论著摘要·刖在肠道黏膜免疫反应中起着非常重要的作用。肠上皮细胞形成规则的微绒毛,而圆顶状,细胞基底部向顶部η幻深陷,形成一中央腔。赴闹醒肭缓艽螅构及定位大大缩短了含有抗原或病原微生物的吞饮小泡跨越赴木嗬耄欣肠道细菌的重要途径,还有报道小肠黏膜内可以摄取抗原物质。巴斯德研究所研究组多年来在对进行的研究中发现,接种蛋昌自从闖和热朔直鹩肞狣狢微粒和减毒伤寒杆菌为运载体票缚诜﨑疫苗以来,已经有多篇报道对口服呙缭谠し阑蛑瘟聘腥尽⒅琢龊凸粜约病中的作用进行了研究,并取得了较好的效果。但口服呙缭诔︷つさ谋泶部位及细胞尚不清楚。肠道黏膜表面是大多数致病菌进人机体的主要通道。接种黏膜疫苗以激发免疫效应细胞的活化是抗感染的主要手段之一。肠黏膜免疫系统中参与免疫应答的细胞遍布于肠黏膜内,其中赴腔爻ε墒狭馨徒疭琍表面滤泡相关上皮產,中的一种特殊的上皮细胞,存在于淋巴滤泡上皮之间,与肠上皮细胞紧密排列在一起,形成上皮屏障,并与其“口袋中的各种淋巴细胞紧密接触。肠腔中的大部分病原体是由赴T酥疗湎碌拿疫细胞,从而引起局部的黏膜免疫反应,乃至系统免疫反应。由此可见,赴赴纬刹还嬖虻奈⒅羼蓿虼擞殖谱魑⒅羼尴赴细胞呈含有丰富的淋巴细胞,其顶部及周边胞质很薄,胞质中含有大量的吞饮小泡,细胞的基底膜常常是不连续的,可允许淋巴细胞自由穿过。赴恼庑┨厥饨于抗原快速进人上皮下淋巴组织。目前的研究表明,小肠绒毛上皮赴巧闳抗原复合体是铣傻哪芄淮碳せ宀赴庖吆吞逡好疫的多种成分之一,国外已有研究者将其试用于免疫生物治疗。比利时布鲁塞尔白主要引起机体细胞免疫功能增强,他们还观察到携带基因的的质粒.
实验材料和方法一、实验动物二、主要试剂其目的基因一般在肌细胞内表达,诱导机体免疫应答的产生,但经口服呙在上述研究的基础上,本实验检测了虻谋泶锊镌诔Φ谰植筐つ疫苗具有:∪庾⑸涓小鼠饕R餞样的应答,⑸湓蛑饕2鶷应答和抗体产生水平增加;肌肉注射治疗膀胱癌,近%的病人外周血和脾脏中馨拖赴鲋常鶬和沟牧吭黾樱醇飨缘腡细胞活化和抗体产生增加;捎盏汲な命的赴可降低迟发型超敏反应的强度。裸呙缇∪庾⑸洌在消化道细胞内表达定位目前尚无报道。到目前为止,已有的一些研究表明口服呙缒苡盏既硇韵赴吞逡好疫应答增强。我们在近期的初步实验中发现口服呙缃氤Φ篮螅诔︷つ吸收过程中将对вψ饔茫俳つっ庖吖δ茉銮浚幸嬗谒ダ虾透腥的上皮细胞的清除与更新,保持黏膜局部结构和功能的完整性。同时,有关其是否产生负效应也有待进一步研究。我们推论口服呙缢娜硇悦庖咝应实际是肠道局部黏膜免疫应答后的一系列反应。上皮细胞、赴虳械姆植迹2骺诜﨑疫苗诱导肠道局部黏膜免疫反应的机制及临床经口接种呙缣峁├砺酆褪笛橐谰荨芰浯菩訡/∈螅鹤灾锌圃荷虾J笛槎镏行摹自锘呙鏿疉;购自公司,鹤訮荆琀猘猚鹤訥荆琍购自公司,—鹤訨购自,无内毒素型超纯质粒炕约梁泄鹤訮公司,珼显色试剂盒购自北京中杉公司。————,
三、实验方法结果讨论苗。将小鼠随机分为椋瓷硌嗡楹椭侍灏刈橹柿W椤7刈镈疫苗在小鼠肠道局部黏膜上皮细胞、赴芭墒狭馨徒肠系膜淋巴结,然而,肠道内发挥免疫效应的效应细胞并不仅限于此,而是遍布还有报道小肠黏膜内可以摄取抗原物质。我们的实验表