微生物革兰氏染色法和芽孢染色法 ppt课件.ppt

文档介绍：实验二
革兰氏染色法和芽孢染色法
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
革兰氏染色法
实验目的
学****并掌握革兰氏染色方法；了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。
实验原理
革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦病理学家Hans Christian Gram 于1884年创立。该法是细菌学中最重要的鉴别染色法。
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
精品资料
你怎么称呼老师？
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？
你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？
教师的教鞭
“不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
第一步：初染:结晶紫使菌体着上蓝紫色；第二步：媒染:碘和结晶紫形成大分子复合物，能被细胞壁阻留在细胞内；第三步：酒精脱色:细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应——G+菌：细胞不能被酒精脱色，仍呈紫蓝色；G-菌：酒精将细胞脱色，细胞无色；第四步:番红复染， G-菌呈红色， G+菌呈紫蓝色。
革兰氏染色原理
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
实验器材
1）菌种： 大肠杆菌和枯草芽孢杆菌
2）染色剂：结晶紫，番红
3）器材：显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等
革兰氏染色法
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
实验步骤
混合涂片法涂片、干燥、固定 结晶紫初染1min，水洗 碘液媒染1min，水洗 用滤纸吸去残水后，将玻片倾斜，在白色背景下，用95%乙醇脱色，直至流出的乙醇无色时，立即水洗 番红复染2min，水洗 干燥后，镜检
注：乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节，脱色不足，阴性菌被染成阳性菌；脱色过度，阳性菌被染成阴性菌
革兰氏染色法
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
实验结果
阳性菌（蓝紫色）
阴性菌（红色）
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
细菌芽孢染色法
实验目的
学****并掌握芽孢染色方法；初步了解芽孢杆菌的形态特征。
实验原理
芽孢：某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。产生芽孢的都是革兰氏阳性菌。
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法
芽孢染色法原理
用弱碱性染料孔雀绿在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体，也可进入芽孢内。进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色后难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体易于区分。
微生物革兰氏染色法和芽孢染色法