文档介绍：微流挡#儿实验室逊艟集成式微流控芯片夹心免疫分析陆瑶姜雷李博伟孔静秦建华1林炳承1 ◆7 中国科学院人连化学物理研究所,人连,116023 1引言免疫分析是测定临床、曲学、生物雨I环境等领域重要物厦的主要手段。微流控器什被认为会给分析化学带来革命性的进艘,就像集成电路给电子1业带米的一样?8‘。近年米,已经有许多将免疫分析集成14徽流控芯片上的报道”J。免疫系缝的微型化带来了很多优点,如提高反应效率,使反应时间从原先的几个小时缩减到几十分钟:降低了样晶和试剂的消耗, 使样品消耗量减少到原先的1/4等。(泵)的多通道免疫微流控芯片。这种芯片将PDMS薄膜夹心j-两片分别刻裔微流控通道和气体控制通道的两片玻璃之间,P删s薄膜可逆封接r两片玻璃2间。膜可更换,玻璃Ⅲ。夹心于两片玻璃之间的非亲水的PDMS薄膜也是免疫分析中蛋白嘲定的载体。采川这种常闭微阀(泵)输返样品,能避免多通道分析中常遇到的样品泄露翘题。本I琳所涉及的芯片集成了144个微蚓和18个井行分析单元,能同时进行18个样品的检删。 2实验部分(略) 3结果与讨论 (微流控液路通道层)包音有蚀刻的微流掩通道锕l样品缓冲液池,卜屡是气体控制气路层,中间为PDMS薄膜,J=}j来形成输运各种免疫试剂的微泵/微润。由于PDIIS能非特异性的吸附蛋白,因此芯片将PDMS膜表面作为免疫反应的碾定载体。这种川于免接分析的蕊片蚬保证了微泵驱动兔缝功能的实现,。,上‘m-两层的玻璃可重复和用,PDMS薄膜可以更换,因此人大降低了生产的成本和制作周期。目1 #]t遭全#&五m&H#Tg" ^事通道奎集成式免癌#析舀片示g巨 B 十**单元的菩十m戚单元和镀胡的i翥翻集成化芯片结构如图1A所示。其中包含有9个独立的、确定的分析单元(图lB所示)。在每个分析单元里,有两路分别含有八个微阀的分析通道。这两个分析通道殃用BsA,二抗, 洗涤缓冲液,和FITC标记的抗体,而样品池单独使用。采用这种构架,可以同时进行18 种不同样品的同一指标的检测。也可以进行一种样鼎的9种指标的同时检测:在一个分析单 0:焉j含崭濂{hc#Jm☆em*hm?m㈣。篇盏十hH?% c“.cmn?㈣。元中检测,种指标,一个分析速道为样品检测,一个分析通道作为参比。在整个芯片中,具有相同功能的阀成圆形排别,由一个电磁阀控制,这样所有的免疫分析过栏均同步进行。 32榱测系统手_={描阵列激光诱导旋光检测系统原理翻如图2所示。具体光路特点如F:激光器发出的中心渡k为473nm的激光经一半反半透镜,(檄光聚焦的光斑人约为几十个微米):收集荧光信号时,荧光分子被激光激发产生荧光,被物镜收集后,经棱镜折射后依技透过半反半透镜、滤光片,聚焦判460¨m的针孔上, 被pMT转换成电信号后,被数据采集扳采集。棱镜系统在步进电机的带动F,绕中心轴旋转完成整个芯片的信号检测。扫描直径为2cm,扫描速度堆人为l周/s,检测灵敏度为l 0× 10“mol/L(FITC标准品