文档介绍：实验(shíyàn)一兔血清免疫球蛋白分离与纯化
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实验课要求(yāoqiú)
预****br/>不迟到(chídào)、早退、不旷课、有事请假
穿白大褂、注意自我防护
不能喧哗，不做与实验无关的事
认真完成实验报告
值日要求：擦桌子、拖地、擦黑板、倒垃圾、关灯和门窗
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一、实验目的
二、实验原理(yuánlǐ)
三、实验仪器及试剂
四、实验步骤
五、注意事项
六、数据处理及计算
实验(shíyàn)一兔血清免疫球蛋白分离
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一、实验(shíyàn)目的
学****并掌握盐析法的原理及用盐析法进行免疫球蛋白分离(fēnlí)与纯化的技术。（IgG ）
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抗体(kàngtǐ)结构
抗体分子(fēnzǐ)是由两条轻链(light chain, L链)和两条重链(heavy chain, H链)通过链间二硫键连接而成。
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二、实验原理(yuánlǐ)一盐析
当用中性盐加入蛋白质溶液，中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质，于是蛋白质分子周围的水化膜减弱甚至消失；同时，中性盐加入蛋白质溶液后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀，这个(zhè ge)过程叫做盐析。
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实验原理(yuánlǐ)-盐析
不同蛋白质由于所带电荷不同以及水化程度不同，加入不同浓度的中性盐可分阶段从溶液中沉淀出来。
蛋白质盐析中最常用(chánɡ yònɡ)的盐是硫酸铵
硫酸铵分级沉淀
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三、实验仪器(yíqì)及试剂
1. 实验材料(cáiliào)：血清（兔免疫血清）。
2. 试剂： PBS、 mol/L NaOH、 HCl、饱和硫酸按（用前以5mol/ L ）、奈氏试剂。
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三、实验(shíyàn)仪器及试剂
3. 用具：三角瓶、烧杯(shāobēi)、各种吸管、小试管、量筒、布氏漏斗、透析袋（用前用PBS或双蒸水煮沸10min）、饭盒（装碎冰）等。
4. 仪器：搅拌器、离心机等。
5. 溶液配制
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三、实验(shíyàn)试剂
饱和(bǎohé)硫酸铵溶液的配制：
称（NH4）2SO4400～425克，以70～80℃之蒸馏水500ml溶解，搅拌20分钟，趁热过滤。冷却后以浓氨水（28%氨溶液）。配制好的饱和(bǎohé)硫酸铵，瓶底应有结晶析出。
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