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质粒DNA提取定量酶切与PCR鉴定实验报告
粒质粒 DNA 的提取、定量、酶切与 PCR 判定一、实验目的 DNA 的要领；； DNA 浓度和纯度的原理和要领； PCR 基因扩增的实验原理和操纵要领；。
二、实验原理 (多聚酶链式反响)
在 DNA 聚合酶催化下，可以 DNA 为模板，以特定引物为延伸起点，以 dNTP 为原料，通过变性、退火、延伸等步调，在体外（缓冲液中）复制 DNA，使目的 DNA 按 2 n 方法呈指数形式扩增。
PCR 一次循环的具体反响步调为：
：加热反响系统至 95℃，使模板 DNA 在高温下完全变性，双链解链。
：逐渐低落溶液温度，使合成引物在低温（35－70℃,一般低于模板 Tm 值的 5℃左右），与模板 DNA 互补退火形成部分双链。
：溶液反响温度升至中温 72℃，在 Taq 酶作用下，以 dNTP 为原料，引物为复制起点，模板 DNA 的一条单链在解链和退火之后延伸为一条双链。
DNA 的提取与制备 (1).碱裂解法：
染色体 DNA 与质粒 DNA 的变性与复性存在差别：
，染色体 DNA 和质粒 DNA 均变性；
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pH 值至中性时，变性的质粒 DNA 复性并生存在溶液中，染色体 DNA 不能复性而形成缠连的网状结构，可通过离心形成沉沉淀去除。
(2).离心层析柱：