文档介绍：中国科学技术大学硕士学位论文多功能荧光探针用于GSH和 Caspase-3的同时检测作者姓名: 学科专业: 导师姓名: 完成时间: 皇锐分析化学梁高林教授二O一三年五月 I删嬲 U niversity ofScience and Technology ofChi na Ad issertation forMaster’Sdeg ree MultifunctionaI fluorescent probe forseq uential detections ofg lutathioneand caspase·3 Author’SName: Rui Huang speciality: Supervisor: T1Flnlshedt皿e: AnalyticalChemistry May 2013 中国科学技术大学学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文,是本人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。除己特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含任何他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名: 中国科学技术大学学位论文授权使用声明作为申请学位的条件之一,学位论文著作权拥有者授权中国科学技术大学拥有学位论文的部分使用权,即:学校有权按有关规定向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可以将学位论文编入《中国学位论文全文数据库》等有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人提交的电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。吆开口保密(——年) 作者签名:熏镒导师签名: 签字日期:塑!i:笪:丝摘要摘要谷胱甘肽(glutathione,GSH)存在于所有动物细胞中,正常情况以硫醇还原性存在,是细胞内主要的非蛋白质巯基化合物,是人体内的一种非常重要的物质, 能够参与机体的多种代谢条件,对维持人体的正常功能有重要的作用。由于GSH 是小分子物质,相较SOD等大分子物质能够较容易地进入细胞,因而GSH能够有效地对细胞内外的氧}自由基发挥清除作用,在许多生命活动中,起着直接或者间接的作用,包括基因表达调控、酶活性和代谢调节、免疫功能调节、保护细胞免受活性氧或毒素的破坏以及氨基酸转运等,氧化应激或亲电化合物可使细胞内 GSH含量降低,或者转化为双硫氧化性(glutathione disulfide,GSSG)。因此对 GSH进行研究能够为许多疾病的致病性提供检测方法,目前己被越来越多地广泛用于各个方面。肿瘤的发生与细胞增殖、分化以及细胞凋亡异常有关。研究表明,肿瘤的发生、发展与肿瘤细胞的凋亡现象相关共存,并且与细胞凋亡速度密切相关。。作为一种重要的凋亡调节和执行的基因产物,其在调控不同组织起源的肿瘤细胞凋亡过程中所起的作用不同,在不同肿瘤组织中的表达亦不同。活性的检测成像,可以了解肿瘤发生、发展的特点,为肿瘤的诊断及靶向基因治疗提供有利帮助。(DEVD)肽段序列能够被 (FITC)荧光基团的多功能荧光探针l以及其对照探针1-Scr,详细阐述了荧光探针的合成路线,并使用HPLC 进行了纯化分析,采用高分辨基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(}Ⅱ)、动态光散射(DLS)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(nM)、紫外可见吸收(UVWis)等手段对其进行了全面地表征。自组装和酶作用解组装过程中目标探针的荧光发生了两次明显的增强,使用量子化学计算构造了荧光增强机理模型,深入探讨了荧光变化过程。细胞毒性实验表明所设计的探针具有良好的生物兼容性,初步的体外细胞显像实验表明探针能够进入细胞并对其标记,实现了对GSH和Caspase-3的同时检测。预计该探针今后可以应用于评估药物诱导细胞凋亡以及恶性疾病的治疗中去。关键词:荧光探针自组装细胞凋亡谷胱甘肽半胱氨酸蛋白酶-3 FITC纳米颗粒荧光“增强一增强” GSH(ghtathione),which isthe main non-protein biothiol found in the intracellularenvironment,normally,exists inallanimal cellsinthereduced thiol state. Tohuman body,GSH isalso akindofveryimportant Callpartic