文档介绍：绪论
植物生物技术概述：指生物技术在植物上应用，涉及植物组织培养技术、人工种子、细胞工程、基因工程等各种生物技术，重要是指植物基因工程和与之有关植物组织细胞培养技术、分子标记育种技术等。
生物技术产生和发展：当代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术建立为标志。发展迅速
植物生物技术展望：植物生物技术被普遍以为是将来人类解决资源短缺不可或缺技术，也是争取农产品高附加值重要技术手段。
What is Biotechnology什么是生物技术：应用该技术通过添加来自另毕生物基因来修饰生物生物功能
第一章 组织培养实验室建设与操作技术
原则组织培养实验室涉及： 洗涤室（准备室）、配备室、灭菌室、接种室、培养室、观测室等。
组织培养所用到器具：镊子类、剪刀类、组培瓶、各类器皿、量筒、移液管、试剂瓶、容量瓶、试管以及移液管架、酒精、玻璃棒、
培养基配制：无机营养成分、有机营养成分、碳源、激素、琼脂、水。 其中无机营养涉及大量元素、微量元素。有机营养涉及氨基酸和维生素。 碳源有蔗糖、葡萄糖、果糖，以蔗糖为主。 激素涉及生长素和细胞激动素
植物生长调节物质：生长素：吲哚乙酸、NAA、2,4-D；细胞分裂素：控制植物细胞分化（比例高时——产生芽,比例低时——产生根）、赤霉素、脱落酸
作用：增进细胞生长和细胞分裂；
诱导受伤组织表面细胞恢复分裂能力；
形成愈伤组织，增进生根；
与一定量细胞分裂素配合共同诱导不定芽分化、侧芽萌发与生长、胚状体诱导。
依照培养物培养过程，培养基分为：初代培养基：用来第一次接种外植体培养基；继代培养基：用来接种继初代培养物培养基。 依照其作用不同，培养基分为：诱导培养基；增殖培养基；生根培养基。
基本培养基：重要有MS、White、N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、Miller等。
完全培养基：基本培养基基本上，依照实验不同需要，附加某些物质，如生长调节物质和其她复杂有机物质等。
培养基配制：计量、移液、取琼脂蔗糖备用、融化、混合、调pH、分装、包扎、培养基灭菌
灭菌工作重要性：防止感染杂菌需要；消除生物污染需要；防腐与保存需要
灭菌办法：a、物理办法：干热、湿热、过滤（）紫外灯、超声波等。
b、化学办法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、双氧水、福尔马林等 。
干热灭菌：合用于玻璃器皿和金属器械灭菌。操作办法：150℃ 、40min或120℃ 、120min，如果发现芽孢杆菌，160℃ 、90～120min。
湿热灭菌：合用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121℃ 维持20～30min。注意点：加足水、排尽气、气压降到0时，才干开盖
过滤灭菌：培养基灭菌普通用高压高温解决，但如果培养基中某些成分遇到高温分解（如某些生长调节剂GA3、玉米素等），就需要过滤灭菌。此外酶、血清等也需要过滤灭菌 。灭菌办法：将生长调节剂或酶配成一定浓度，用注射器注入微孔滤膜虑，～。制培养基时，现将培养基高压灭菌，待降至50℃左右时，加入适量激素，然后分装。
射线灭菌：重要是运用紫外灯进行照射，适合实验室空气、操作台等，灭菌时间20～30min。
火焰灼烧灭菌：用火焰灼烧达到灭菌目，合用于接种器皿灭菌。
消毒剂
消 毒 剂
使用浓度(%)
消毒时间(min.)
效 果
残液去除难易
乙醇
70-75
-3
好
易
氯化汞
～1
2～15
最佳
最难
过氧化氢
10～12
5～15
较好
最易
抗菌素
4～50mgl-1
30～60
较好
较难
次氯酸钙/纳
9 ～ 10
5～30
好
易
无菌操作技术
实验器具和材料准备
用75%酒精擦拭超净工作台，然后室内及超净工作台用紫外灯杀菌20min-30min。注意：台面上用品不要放置太多或重叠放置，以免减少灭菌效果。
关紫外灯、打开风机，过5-10min进入缓冲间，以75%洗手和手臂，更换无菌服、帽子和口罩。进入接种室。（注：没有特别状况，尽量不要下工作台）
外植体和外质体灭菌：
取流水冲洗（至少30min）过外植体，用一定消毒剂浸泡消毒，用无菌水冲洗3~4次，放入无菌培养皿中，置于酒精灯火焰下方，用无菌接种器械进行分离、切割或其她解决。
打开培养瓶，瓶口在灯焰处旋转灼烧，用镊子将培养材料置于培养基上，灼烧镊子放回，灼烧瓶口，盖上瓶塞。
用酒精擦洗工作台和手。进行下一轮操作。
无菌操作注意事项
（1）进行培养时，动作要精确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增长污染机会。
（2）不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备