文档介绍：因为HPV不能在体外细胞培养，故不能用简便血清血检测进行HPV诊疗和分型。临床上用于检测HPV方法包含细胞学方法、免疫组化、原位杂交、斑点杂交、核酸印迹和PCR等，其中以PCR方法敏感性最高，是现在应用最多
感染HPV型别、含量、连续时间决定病变发展和预后,是进行HPV检测关键内容。现在关键是经过应用分子生物学方法进行HPV DNA检测。
1、现有HPV试验室关键检测手段:
① 聚合酶链反应(PCR, Polymerase Chain Reaction):扩增在两段已知序列之间DN***断方法。该法有较高敏感度,可进行HPV分型,缺点是对试验室环境要求较高,轻易发生样本间交叉污染,从而造成假阳性率高。
② 核酸杂交检测
有很好特异性和敏感度,还能够进行HPV DNA分型,多种核酸杂交检测方法有一定优缺点。
A核酸印迹原位杂交
适适用于HPV分型和HPV DNA分子量判定,即使灵敏度高,但因操作复杂,需要新鲜组织标本,不便在临床上大规模使用。
B斑点印迹
其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法,即使经济实用,但试验过程存在有放射性污染,是环境保护所不能轻视问题。
C原位杂交（in situ hybridization，一个核酸杂交技术，可用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子所在部位，检测重组体DNA） 经过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。
D杂交捕捉法(Hybrid Capture)
杂交捕捉试验是利用化学发光对抗体捕捉信号加以放大。首先使DNA双链释放并分解成为能够杂交核苷酸单链,DNA单链和RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕捉,偶联有碱性磷酸酶第二抗体和RNA-DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光,依据光强弱可确定碱性磷酸酶含量,从而确定RNA-DNA杂合体含量。能检测13种高危型HPV,包含HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。
 
多种检测方法比较 
多种检测方法比较
方法学
灵敏度
特异性
技术特点
细胞学（Cytology）
低
低
操作轻易，成本较低，正确度较差
斑点印迹（Dot blot）
中
中
有一定放射性
核酸印迹原位杂交（southern blot  hybridization）
高
高
标准、麻烦，不宜大规模使用
原位杂交（In Situ hybridization）
高
中
蜡块组织包埋内检测HPV
杂交捕捉（HC、HC2）
高
中
无放射性，易使用，高、低危型间有交叉反应，且不能分型
一般多聚酶链反应（PCR）
很高
中
取材轻易，但现在已应用试剂只能检测少数单一型别，如6、11、18等，且因为技术上问题存在假阳性
 
 
 
2、最新推出HPV试验室检测技术
高灵敏度高危型HPV分型多色荧光实时PCR试剂：为欧洲著名分子生物学研究机构专门针对宫颈癌筛查而全新设计高危型HPV分型多色荧光实时PCR检测试剂，可同时检测高危型中最关键16、18、31/33、35/45型。
了解宫颈疾病人乳头状瘤病毒（HPV）感染患者中HPV亚型分布情况及高危型HPV年纪分