文档介绍：抗体检测知识点——抗体检测方法(一)中和反应中和反应不仅测定抗体是否存在, 而且测定抗体是否具有免疫保护作用, 因而, 尽管这种方法复杂费时,影响因素众多而且不稳定,在预防医学领域特别是病毒性疾病中,仍然是不可取代的抗体检测方法。中和试验的基本方法是,将待检物质与活的致病微生物混合,感染实验动物或敏感的细胞,然后观察实验动物是否发病、死亡,或细胞是否发生病变。早期中和实验主要利用疾病的动物模型进行,目前,在病毒性疾病领域,通常利用培养病毒的细胞进行。在结果的解释中应当注意,细胞的中和试验通常只反应抗体阻断病毒进入细胞的能力,这只是病毒致病过程中的一小部分。(二)沉淀反应血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等可溶性抗原与相应抗体结合出现沉淀物, 这类反应称为沉淀反应。该类反应可检测到 20 ~ 2mg / ml 水平的抗体。较常用的检测方法有: 1 .单向免疫扩散将一定量已知抗原混于琼脂中制成琼脂板,在适当位置打孔后将抗体加入孔中扩散,抗原抗体在扩散过程中形成以抗体孔为中心的沉淀环,可用于检测血清中的 IgG 、 IgM 、 IgA 和补体 C3 等的含量。 2 .双向免疫扩散将抗原与抗体分别加于琼脂凝胶中,二者自由向四周扩散,在相遇处形成沉淀线。可用于抗体的定性、定量检测。(三)凝集反应细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块,这一类反应称为凝集反应,该类反应可检测到 1μg/ ml 。 1 .直接凝集将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应,出现细菌或红细胞凝集现象。检测方法有两种:一是玻片凝集试验,用于定性测抗原,多用于快速诊断;二是试管凝集试验, 在试管种系列稀释待检血清, 加入已知颗粒抗原( 死菌或活菌, 多用死菌), 进行的血清反应,用于定量检测抗体。温箱中放 24 小时后取出反应管在室温放 2 个小时再判断为宜,判定凝集滴度以凝集程度为++ 而定。 2 .间接凝集将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表明,与相应抗体反应出现颗粒凝集的现象。如用γ球蛋白包被的乳胶颗粒, 检测病人血清中的一种抗γ球蛋白的抗体(类风湿因子)。(四)补体参加的反应利用抗体与红细胞上的抗原结合, 激活反应体系中的补体, 导致红细胞的溶解, 用溶血现象作为指示系统帮助结果判定。常用的方法有补体结合试验和溶血空斑试验。(五)用标记抗原进行的抗原抗体反应利用荧光素、酶或放射性核