文档介绍：人民医院输血科 ABO 血型鉴定
1、测定原理
根据红细胞上有或无 A 抗原或／和 B 抗原，将血型分
为 A 型、 B 型、 AB 型及 O 型 4 种。可利用红细胞凝集试
验，通过正、反定型准确鉴定 ABO 血型。所谓正定型，是用已知抗— A 和抗— B 分型血清来测定红细胞上有无相应
的 A 抗原或／和 B 抗原；所谓反定型，是用已知 A 细胞和
B 细胞来测定血清中有无相应的抗— A
或／和抗— B。
2、标本种类及收集要求
受检者血清；
枸缘酸钠抗凝血或未稍取血，受检者血液制成 5 ％红细
胞盐水悬液使用，制备方法见本节附注。
标本出现中度溶血者，为不合格标本，不能用于检测。
3、仪器、试剂、校准品、质控品、培养基、以及其他所需
物品
抗 A 、抗 B 血型定型试剂（单克隆抗体） ：
4、操作步骤
、试管法
取洁净小试管 (内径 10mm× 60mm)3 支，分别标明抗—
A 、抗— B 和抗— A 十 B ，用滴管分别加抗— A 、抗— B 和
抗— A 十 B 分型血清各 l 滴（约 50 ul ）于试管底部，再
以滴管分别加入受检者 5％红细胞盐水悬液 1 滴，混和。
另取洁净小试管 (内径 10mm ×60mm)3 支，分别标明
A 、B 和 O 细胞。用滴管分别加入受检者血清 l 滴于试管
底部，再分别以滴管加入 A 、B 和 O 型 33％试剂红细胞悬 液
滴，混和。
立即以 1000r／ min 离心 3 min 。
将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内
眼观察有无凝集 (或溶血 )现象。如内眼不见凝集，应将反应
物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此
有助于 A 、 B 亚型、类 B 或 cisAB 的发现。
凝集强度判断标准
4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。
3+ 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。
2+ 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细
胞。
1+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。
± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很
多游离红细胞。
MF 混合凝集外观 (mixed field) 是指镜下可见少
数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。
表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
玻片法
取清洁玻片 1 张 (或白瓷板 1 块 )，用蜡笔划成方格，
标明抗 -A 、抗 -B 和抗 -A 十 B，分别用滴管滴加抗 -A 、抗 -B
和抗 -A 十 B 分型血清 l 滴于标明的方格内，再各加受检者
2％红细胞悬液 1 滴，混和。
另取洁净玻片一张 (或白瓷板 1 块 )，用蜡笔划成方格，
标明 A 细胞、 B 细胞和 O 细胞，用滴管各加受检者血清 1
滴，再分别用滴管滴加 A 、 B 和 O 型试剂红细胞悬液 1 滴。
将玻片 (或白瓷板 )不断轻轻转动， 使血清与细胞充分混
匀，连续约 15 min ，先以肉眼观察有无凝集 (或溶血 )反应；
再在低倍镜下观察结果。
5、结果判定
ABO 血型正反定型结果
分型血清 + 受检者红细胞 受检者血型 受检者血清 + 试剂
红细胞
抗-A 抗-B 抗-A十B A细胞 B细胞 O细胞
+ - + A - + -
- + + B + - -
- - - O + + -
+ + + AB - - -
注： +为凝集； -为不凝集。
6、注意事项：
分型血清