文档介绍：高效液相色谱仪操作步骤:
.过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。
.对抽滤后的流动相进行超声脱气 10-20 分钟。
.打开 HPLC 工作站(包括计算机软件和色谱仪) ,连接好流动相管道,连接检测系统。
.进入HPLC控制界面主菜单,点击 manual,进入手动菜单。
.有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的
出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在 manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲
洗时速度不要超过 10 ml/min 。
.调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要
超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击 on,走基线,观察基线的情况。
.设计走样方法。点击file,选取select usersand methods,可以选取现有的各种走样方法。
若需建立一个新的方法,点击 new methodo选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,
根据需要而不同。选完后,点击 protocol。一个完整的走样方法需要包括: a•进样前的稳流,
一般2-5分钟;;-inject转换;,随不同的样品而不同。
.进样和进样后操作。选定走样方法,点击 starto进样,所有的样品均需过滤。方法走完
后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线, 洗掉剩余物。
.关机时,先关计算机,再关液相色谱。
.填写登记本,由负责人签字。
注意事项:
.流动相均需色谱纯度,水用 20M 的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起
气泡。
.柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。
.所有过柱子的液体均需严格的过滤。
.压力不能太大,最好不要超过 2000 psi