文档介绍：主要内容
1、胶体金的制备原理、方法、注意事项、质量鉴定、胶体金保存
2、免疫金的制备原理、技术要点
3、免疫金
测定技术
斑点金免疫渗透试验的原理、技术类型
斑点金免疫层析试验的原理、技术要点
临床应用及评价
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胶体金（colloidal gold）也称金溶胶（goldsol），是金盐被还原成原子金后形成的金颗粒悬液。
什么叫胶体金
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zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥，以维持胶体金的稳定状态。
基础金核
双离子内层负离子（AuC12－） zeta电位
外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中
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胶体金的制备
制备原理
还原法：用一定量的还原剂把一定浓度的金盐溶液还原成金离子。
常用的金盐是***金酸
还原剂是枸橼酸钠、鞣酸、维生素C、白磷、硼氢化钠
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胶体金的制备
制备方法
***金酸水溶液加热沸腾》》搅拌着加入枸橼酸钠水溶液》》金黄色的***金酸水溶液在2min内变为紫红色》》再煮沸15min冷却后以蒸馏水恢复到原体积
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胶体金的制备
注意事项
1）、玻璃容器的清洁容器使用前必须酸洗和硅化
硅化的一般过程用5%的二***二甲硅烷的***仿溶液浸泡玻璃容器1min，室温干燥后，用蒸馏水冲洗，在干燥备用。
2）、试剂、水质和环境 ①使用***金酸时不能用金属药匙，避免接错天平秤盘②双蒸馏水，实验室尽量无尘③～、～-～，但应控制浓度不要太高
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胶体金的制备
质量鉴定和胶体金保存
㈠质量鉴定①外观检查清亮透明悬液
②颗粒大小与均一性检查肉眼观察或分光光度计扫描或者电镜检查
㈡胶体金保存洁净玻璃器皿，放入少量防腐剂，少量分装备用
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免疫金制备
胶体金与抗原抗体等大分子物质结合形成
制备原理
将蛋白质吸附到胶体金颗粒表面而结合的过程
环境pH值和离子强度是影响吸附的主要因素
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免疫金的制备
技术要点
㈠胶体金溶液pH值的调配
／／LHCl调整到标记蛋白质带等电点货稍偏碱。通常要经多次试验。
㈡蛋白质最适用量的确定
用标记蛋白质作系列稀释，，并设不加蛋白质的对照管加入10%、静置2小时。选以红色不变管中蛋白质含量最低为稳定1ml胶体金所必需蛋白质的量。
㈢胶体金的标记
按照最适比，在电磁搅拌下将所需要量的胶体金加入一定量的蛋白质溶液中，加入一定量的稳定剂，，离心，轻吸上清液，用缓冲液悬浮，恢复原体积后再离心，重复操作2、3次。
㈣胶体金结合物的纯化与鉴定
纯化：超速离心法和凝胶过滤法
鉴定：电镜测定颗粒的平均直径以及免疫组化滤纸模型测定结合物的特异性、敏感性
㈤保存
用稀释液配制成工作浓度保存
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金免疫测定技术分类
斑点金免疫渗滤试验 DIGFA
（dot immuno-gold filtration assay）
斑点金层析试验 DICA
（ dot immunogold chromatographic assay）
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