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培养基制备实验报告
篇一：培养基的制备与灭菌实验报告
陕西师范大学远程教育学院
生物学实验报告
报告题目培养基的制备与灭菌
姓名刘伟
学号
专业生物科学
批次/层次
指导教师
学习中心
培养基的制备与灭菌
一、目的要求
掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
掌握培养基的配置原则和方法。
掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。二、基本原理
牛肉膏蛋白胨培养基：
是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又
称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖
所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
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高压蒸汽灭菌：
主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，
压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。
仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三
角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花
等。
四、操作步骤
（一）玻璃器皿的洗涤和包装
1．玻璃器皿的洗涤
玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培
养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用
自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再
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用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘
干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装
1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包
成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花
(勿用脱脂棉)，它的作
用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入
口中。，棉花自身长度约1~。塞棉花时．可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。
先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端
放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，有手将移液管压紧．在桌面上向前搓
转，以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。
（二）液体及固体培养基的配制过程
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1．液体培养基配制
（1）称量（假定配制 1000ml培养基）
按培养基配方比例依次准确地称取、
蛋白胨、（或1000ml刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
（2）溶化
在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将药品完全
溶解后，补充水到所需的总体积（1000ml）；如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放人已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
3）调pH
调pH：一般用pH试纸测定培养基的pH。用剪刀剪出一小段pH试纸，然后用镊子夹取此段pH试纸，在培养基中蘸一下，观看其pH范围，如培养基偏酸或偏碱时，可用1mol/L
NaoH或1mol/LHCl溶液进行调节。调节 pH时，应逐滴加入
NaOH或HCI溶液，防止局部过酸或过碱，破坏培养基中成分。
边加边搅拌，并不时用 pH试纸测试，直至 - 。
反之，用1mol／LHCl进行调节。
2．固体培养基的配制
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配制固体培养基时，应将已配好的液体培养基加热煮沸，
再将称好的琼脂 (~2％)加
入，并用玻棒不断搅拌，以免