文档介绍：导师签名:文、缰迹作者签名:害型学位论文作者签名童肭扼凶秩掌冢荷鎔年拢稳学位论文版权使用授权书⒈C芸冢诳谌辏谖澹āD杲饷芎笫视帽臼谌ㄊ椤关于学位论文独立完成和内容创新的声明口期:枷阦月学院邀生塑量生丝药堂专业鄞盛感髡姓名谏蜓粢┛拼笱Чザ敛┦緿/硕士团学位而完成的作品。本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得任何教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。论文《腺相关病毒载体介导的抑制的表达》系制药工猩本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权沈阳药科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于⒉槐C芡拧朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉”日期:。。。辍月,∥日
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,侵赋痹瓷A丛ˋ所琴⒌奶匾煨蛄械淖腺相关病毒载体介导的抑制的表达摘薅录后基因沉默现象。它被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。腺相关病珹靥迨且恢钟行У暮怂岬菟驮靥澹山∑蜠蕞效低毒的转入哺乳动物细腿。多功能转录阏子—结台因子嵌嘈恐附峁沟鞍祝矶啾ǖ辣砻髌溆胫琢龅姆⑸岸喔龌虻牡骺赜忻芮本课题旨在利用小干涉瑂种艭趂缡瓣中静表达,避两研究改交所致调控霞络豹整铍け浯浚冀沂綜墓本课题首先针对的设讨的税位,遴过筛选确定霭形坏恪9建带有启动子魄ㄓ帽泶镌靥澹直鹫攵个位点构建抑制表达魄病簿包装质粒,包鼗重组腺相关病海。将莺组病毒感染细胞后分别挑取能稳定表达盢醯ヶ聍寺。踩斓鹑嗔谩6魇凳庇ü舛縋法和〖法检测细胞克隆的表达水平。结果发现在水平,以正常细胞为对照,A璨危珻颈泶镛┽钥啥上吕佘ィ诘暗撼衅剑搪次对照,產为内参,的表达也被下调%左右。在上述研究中,下阵幅度,凝自下降幅度与编胞生长籀制程度之间具有明显的相关性,提示正常表达对细胞生长的羹要性。同时本课题还对脂质体—/转染的方法进行了探讨,自己制备了脂质体。⑶医付俗H臼笛樗尉醋钍逝ǘ群陀胱H隓的最佳比铡。剥赝此方法方便快速的大量制备重组腺相关病毒获得成功。本课蘧为整痉毂u緾粢虿胈;萎螽翔关表达谱翁改变提供了重要豹实验依据和必要的技术支持。关键词:缮妫欢谭⒓蠷;转录因予;腺相关病毒载体。。能。,沈┛拼笱十学位论兜中义摘要
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篟沈└笱;铣肝宦垡—/猘岛,珻,
,ハ螅缣蛭R理坝鑂懿基圆沉默凝划,是指通过双链特异性的抑制靶基因表达的王见象,因此叉被称为转录厝摹困沉弑现象猼—琍,在施质巾双链⒘送磎慕到狻窒笫钦婧松锢攵缺J氐姆肿踊疲控制基因表达,并保护它们的旗函组免受外源可移动嫠因的入侵,如转座子、瘸毒等。这张现象是屯略诙园E=醒芯渴狈⑾值摹闒热嗽线虫中也发现了这种现象引,后来称之为扇拧T谒婧蟮募改曛校琑窒蟊广泛熬发理予粪藿、撬勃亵鬃撬等其它各赞真投生甥中口“。通过实验,人们提出一种作用的简单模型,可能的作用途径分为两种:~耪途径阻袋疆和滚毳动物为伐袭,男⋯释是以线虫、,产生的靶芤徊皆贒喙氐暮怂崦福小ǜ雎菪峁褂的作用下,产生大量的锏接行ǘ鹊膕§%够启动机制降解目标。外源或内源的双链胂赴螅贒的切割下生成膕,肫淠依莸按颜鹦纬捎盏汲聊春仙猧琑结构并被激活,贏提供的能量下解链,以它的反义链俸为模蔽谖爨旨麴,弓嘉焊春厦囟云溴孕薪到狻穕啊W钪蘸嗦史税贻氪腊表达。反义的赡苁峭ü车腤狢碱基配对原则,与目的艇因特异性结合而执行相应的功能。姆匆辶唇岷系嚼隰餸螅唤鲇盏糝该基幽进行降解,同时还激活分导的单链暮铣桑罅康膁,这些俅伪籇切割成许多胂隆ǜ鯮贰R虼耍恍枭凫的每梢圆匾煨攒病⑸P缘幕虺聊饔谩作用的简单机制如下图:引言谖
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