文档介绍：word
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预测指标：
、MDA
2. 可溶蛋白、超氧阴离子自由基
、类胡萝卜素
7. 谷胱甘肽、ASA
1. 抗氧化酶系统、MDA
A 酶活总体积(ml)/组织鲜重(g)/1000----------
植物体可溶性蛋白质含量测定
比色原理：
染料考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白质浓度X围内〔0～100μg/ml〕，蛋白质－色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比。故可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反响十分迅速，其结合物在室温下1h内保持稳定。该反响非常灵敏，可测微克级蛋白质含量，所以是一种比拟好的蛋白质定量法。
【试剂】
1、65mmol/L磷酸钾缓冲液()； 如超氧阴离子自由基含量测定用。
称取K2HPO4·3H2O(MW=)(MW=)，蒸馏水定容到1L。或K2HPO4·3H2O ，。
2、考马斯亮蓝G-250：称取100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 90%乙醇中，参加85%〔W/V〕磷酸100ml，最后用蒸馏水定容至1000ml。滤纸过滤后低温储存。常温下可放置一个月；
3、磷酸〔85%，W/V〕：也即商业磷酸(浓度≥85%)。直接用。
4、 (标准曲线用)：。
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【方法】
血清白蛋白(BSA)。
表1 配制0～1000μg/ml血清白蛋白液
管 号
1
2
3
4
5
6
牛血清蛋白原液(ml)
磷酸钾缓冲液量(ml)
蛋白质含量(μg/ml)
0
0
200
400
600
800
1000
以上各管混匀后，，各加5ml考马斯亮蓝染液，混匀放置2min，在595nm下比色，绘制标准曲线。折衷：
表 2 配制0～1000μg/ml血清白蛋白液
管 号
1
2
3
4
5
6
牛血清蛋白原液(ul)
磷酸钾缓冲液量(ul)
蛋白质含量(μg/ml)
0
100
0
10
90
200
20
80
400
30
70
600
40
60
800
50
50
1000
以上各管混匀后，各加5ml考马斯亮蓝染液，混匀放置2min，在595nm下比色，绘制标准曲线。
样品制备参见超氧阴离子自由基含量测定方案。，各加5ml考马斯亮蓝染液，混匀放置2min，在595nm下比色。
样品蛋白质含量〔mg/g鲜重〕=C*V/W
式中 C－查标准曲线所得每管蛋白质含量〔mg/ml〕；V－提取液总体积〔ml〕；此