文档介绍：2010 生物技术制药复习提纲一、基本概念 1. 质粒: 细菌细胞内一种自我复制的环状双链 DNA 分子,能稳定地独立存在于染色体外, 并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上。 2. 生物药物: 生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果, 综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法, 利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物, 包括生物技术药物和原生物制药。 3. 贴壁细胞: 这类细胞的生长必须有可以贴附的支持物表面, 细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长,繁殖。 4. 单克隆抗体: 只识别一种表位( 抗原决定簇) 的抗体, 来自单个B淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。 5. 多克隆抗体: 由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位(抗原决定簇)的高纯度抗体。 - 鼠嵌合抗体: 将鼠源抗体的可变区与人源抗体的恒定区融合而制成的抗体。其具有鼠源抗体结合抗原的特异性和亲和力,同时降低了鼠源抗体对人体的免疫原性。 7. 改形抗体/Fab Fv 抗体/ 单链抗体 8. 植物的分化 9. 脱分化: 是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。 10. 再分化: 某种组织细胞去分化后变为原始未分化状态,随后分化为另一种组织细胞的过程。多存在于再生过程中。 10. 愈伤组织: 原指植物体的局部受到创伤刺激后, 在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。 11. 继代培养: 继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后,营养物枯竭,水分散失, 并已经积累了一些代谢产物, 此时需要将这些组织转移到新的培养基上, 这种转移称为继代培养或传代培养。 12. 固定化酶: 水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。在催化反应中以固相状态作用于底物。 13. 固定化细胞 14. 模拟酶: 用合成高分子来模拟酶的结构、特性、作用原理以及酶在生物体内的化学反应过程,所制造的具有酶性质的催化剂。二、技术原理 1. 简要说明影响目的基因高效表达的因素(1 )外源基因的剂量细菌内基因拷贝数增加,基因的表达产物也增加。(2 )外源基因的表达率启动子的强弱核糖体结合位点的有效性 SD 序列和起始密码的间距密码子的组成(3) 表达产物的稳定性即使外源基因原始表达量很高, 由于很快在菌体内被降解, 导致实际产量很低。(4) 细胞代谢负荷大量的外源基因表达产物可能打破宿主细胞的生长平衡, 从而影响到其他代谢过程。 2. 基因载体应具备的条件①载体 DNA 是单个复制单元,在宿主细胞内应具有 DNA 独立复制能力; ②分子尽量可能的小,以便容易从细胞中分离纯化,便于离体条件下操作③含有多种限制性内切酶的单一切点。在切点内可以与外源 DNA 进行连接、重组; ④载体内有不影响其复制、生长的非必要区域,在此区域内可以插入、接受外源 DNA ,外源 DNA 与载体分子一起复制、扩增; ⑤具有多种选择性标志, 如营养缺陷型、抗药性、形成噬菌斑的能力、外源性蛋白质的产生等,作为区分重组的转化子与非重组转化子的指标。 3. 导致基因工程菌中质粒不稳定的原因及如何提高质粒的稳定性质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳