文档介绍：大肠菌群计数检验操作规程颁发部门质量部新订■修订□复审□页数共 2页文件性质管理标准■操作标准□技术标准□文件编码原编编码起草年月日审核年月日批准年月日 QC年月日执行日期年月日分发部门质量管理部、 QC 一、目的建立大肠菌群计数检验的标准操作程序,使操作过程规范化。二、适用范围适用于大肠菌群计数的检验操作。三、职责。 2. QC 主管监督检查执行情况。四、程序 ( coliforms )的测定大肠菌群:在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 ,其他设备和材料如下: 恒温培养箱: 36℃± 1℃,30℃± 1℃。冰箱: 2℃~ 5℃。恒温水浴箱: 46℃± 1℃。天平:感量为 g。均质器。振荡器。无菌吸管: 1 mL (具 mL 刻度)、10 mL (具 mL 刻度)或微量移液器及吸头。无菌锥形瓶:容量 500 mL 。无菌培养皿:直径 90 mm 。 pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。菌落计数器。月桂基硫酸盐胰蛋白胨( Lauryl Sulfate Tryptose , LST )肉汤:见附录 A中。煌绿乳糖胆盐( Brilliant Green Lactose Bile , BGLB )肉汤:见附录 A中 :见附录。无菌生理盐水:见附录。无菌 1mol/L NaOH :见附录。无菌 1mol/L HCl :见附录。 MPN 计数的检验程序见图 1。 36℃± 1℃48h ±2h 36℃± 1℃ 48h ± 2h 图1 大肠菌群 MPN 计数法检验程序样品的稀释固体和半固体样品:称取 25g样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内, 8000 r/min ~10000 r/min 均质 1 min ~2 min ,或放入盛有 225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min ~ 2 min ,制成 1:10 的样品匀液。液体样品:以无菌吸管吸取 25 mL 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成 1:10 的样品匀液。样品匀液的 pH 值应在 ~ 之间, 必要时分别用 1 mol/L NaOH 或1 mol/L HCl 调节。用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液 1 mL ,沿管壁缓缓注入 9 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支1 mL 无菌吸管反复吹打,使其混合均匀,制成 1:100 的样品匀液。根据对样品污染状况的估计,按上述操作,依次制成十倍递