文档介绍：细菌的培养与接种技术
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细菌实验室
进行细菌学实验的场所，标本的接种、培养、分离、鉴定、药敏等工作在此完成。
细菌室要防止外界污染，还要避免细菌播散。
配备紫外灯、消毒剂等。注意定期消毒。
对无菌物品和细菌的培养与接种技术
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细菌实验室
进行细菌学实验的场所，标本的接种、培养、分离、鉴定、药敏等工作在此完成。
细菌室要防止外界污染，还要避免细菌播散。
配备紫外灯、消毒剂等。注意定期消毒。
对无菌物品和标本应明显分开放于指定位置，同时要对用过的物品及时进行灭菌处理。
保证细菌室的温度。
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无菌实验室
是细菌实验室内用于无菌操作的小室，要求更严格。
完全封闭，应有缓冲区。
用前要用紫外灯消毒30min,定期用甲醛熏蒸消毒。
仅限于分装培养基及传染性强的细菌接种。
要保证本室的无菌状态。
保证本室的温度。
无菌实验室可用超净工作台代替。
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培养基
常用玻璃器材的准备
培养基的成分和作用
培养基的种类
培养基的制备
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培养基的成分和作用
培养基：是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。
(1) 营养物质：蛋白胨(氮源)、肉浸液（氮源和碳源）、牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类
(2) 水
(3) 凝固剂：琼脂、明胶
(4) 抑制剂：非生长必需，而是选择、鉴定及判断结果的需要
(5) 指示剂：便于观察细菌
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培养基的种类（按用途分类）
基础培养基：培养营养要求不高的细菌，如普通平板
营养培养基：能满足营养需求较高细菌的生长，如血平板
鉴别培养基：含有某些特定的底物，用于鉴别细菌，如克氏双糖培养基（KIA）
选择培养基：具有选择性抑制作用，用于选择性的培养目的菌，如SS平板
增菌培养基：促进目的菌的生长，适用于含菌量较少的标本，如葡萄糖肉汤。
厌氧培养基：用于培养厌氧菌
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培养基的种类（按物理性状分类）
液体培养基：不含凝固剂，用于增菌和接种纯种细菌。
半固体培养基：％～％琼脂，用于观察细菌的动力。
固体培养基：含2％～％琼脂，多用于细菌的分离培养。
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培养基的制备
玻璃器皿的消毒灭菌
制备的程序
调配
溶化
矫正pH
过滤澄清
分装
灭菌
鉴定
保存
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细菌接种的基本程序
灭菌接种环
沾取标本
接种
灭菌接种环
杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本
杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境
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细菌接种法
平板划线接种法：
★目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得纯菌。
★方法：
分区划线法：适用于含菌量较多的标本
连续划线法：适用于含菌量较少的标本
液体培养基接种法
穿刺接种法 :用于观察细菌动力
斜面接种法
倾注培养法:用于细菌计数
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分区划线法
第一区划线
灭菌接种环
第二区划线
灭菌接种环
第三区划线
灭菌接种环
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连续划线法
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细菌培养法
一般培养（需氧培养）：
★培养温度：35℃（采用恒温培养箱）
★培养时间：18～24h
二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培养箱
厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等
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细菌在固体培养基中的生长现象
菌落
★定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。
★菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性
★菌落类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）
菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。
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菌 落
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菌落与菌苔
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