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超滤管使用方法和注意事项.docx

上传人:fangjinyan201701 2022/1/26 文件大小:30 KB

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超滤管使用方法和注意事项.docx

文档介绍

文档介绍:超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD也有其它型号的、不同体积大小和MWCO滤管可选,视目的蛋白的分子常含有一些金属离子,在丙烯酰***(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatmanl号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰***和双丙烯酰***会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
.40沏烯酰***
【配制方法】把380g丙烯酰***(DNAAM序级)和20gN,N'-亚甲双丙烯酰***溶于总体积为600ml的蒸储水中。继续按上述配制30%5烯酰***溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸储水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30沏烯酰***白说明,40%5烯酰***溶液用于DNAff列测定。
.放线菌素D溶液
【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml100叱醇中,1:10稀释贮存液,用100叱醇作空白对照读取OD44C®。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20C0
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。
(ATB溶液
【配制方法】,用蒸储水定容1ml,分装成小份保存于-
【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。%i硫酸俊溶液
【配制方法】把1g过硫酸俊溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4c保存数周。

【配制方法】-溟-4-***-3-呷咪磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml100%勺二***甲酰月5中,
【配制方法】[NN-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、、然后加入蒸储水定容至100ml,,分装成小份,保存于-20C。
1mol/LCaCl2溶液
【配制方法】在200ml蒸储水中溶解54gCaCl2?,分装成10ml小份贮存于-20C。【注意】制备感受态细胞时,
取出一小份解冻并用蒸储水稀释至100ml,用Nalgene滤器()过滤除菌,然后骤冷至0C。

【配制方法】?6H2O,,分装成1ml小份贮存于-20C。
1mol/L二硫苏糖醇(DTI)溶液
【配制方法】用20ml0