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畜禽粪便中典型抗生素抗性基因的检测和分析.pdf

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畜禽粪便中典型抗生素抗性基因的检测和分析.pdf

上传人:碧痕 2022/1/27 文件大小:2.35 MB

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畜禽粪便中典型抗生素抗性基因的检测和分析.pdf

文档介绍

文档介绍:万方数据
畜禽粪便中典型抗生素抗性基因的检测和分析引言宇,直俊强,石奥,张建淼,李延隆,陈宜军·试验研究·刘近年来,随着我国畜牧养殖业迅猛发展,抗生素被长期大量的应用于畜牧养殖业。据统计,年我国抗生素使用量在.騮以上,其中有/甧畇通过���Ⅺ�\�恢突杵罢籖御辩譬峰一蛸肿粥�结果与分析~‘�耍�×����丝Ы悄�质粒用试剂盒����勒丈��趟得鞯姆椒ㄌ崛 �提取的质粒用微量核酸蛋白质分析仪�����检测含量以及纯度,按�倍浓度梯度稀释,基因拷贝数计算参照文献¨�,以��ǘ�拷贝数荧光定量��瞧髦薪�小7从μ逑滴���,其验,使用软件�����煅榻�胁钜煜灾�员冉希�渲蠵�.�2钜���凳庇ü舛�縋�仪扩增后,利用��荧光定量��标准曲线的制作����的对数为横坐标,��捎ü舛�縋�仪直接测得�W葑�辏��菹率交嬷票曜记�摺�式中�:铣珊笾柿V柿颗ǘ龋琻��荓;��质粒和插入的目的基因片段的总碱基数,�;��拷贝数,���/¨����.�ü舛�縋�反应体系及程序定量��从υ贐������凳�中模板�����稀⑾掠我���斗��疞��—��水�稬。实时定量采用两步��┰龇ǎ�程序为:�℃�,�℃�,�℃����鲅�罚�反应结束后对获得的信号和数据进行处理。��相对丰度分析由于不同养殖场粪便中微生物总量不同,为减少偏差,将��的浓度与其内参基因����的浓度做归一化处理,得到各��的相对丰度。��相对丰度���奖词�����拷贝数��数据分析所有的统计数据均来自至少三次以上的独立实��进行数据分析和不显著,����2钜煜灾�J�萦谩捌骄�怠�标准误”���繱.�甅�男问浇�斜硎尽�实时荧光定量���考觳饨峁�对畜禽粪便中典型耐药基因及其内参基因�����蠶���考觳狻M�和图�怯τ�����砑�玫降谋曜记�吆腿芙馇�线,以����@����养殖场粪便中耐药基因绝对丰度分析目的基因绝对拷贝数可以反映微生物生物量的基因表达丰度,因此对�家规模化养殖场粪便样品中�挚剐曰�蚩奖词��屑觳猓�苑从逞�吵�粪便中耐药基因绝对丰度,结果如表��尽�一�心�四川环境�卷�尽�����睦┰銮�吆捅曜记����.�����������������羘×�—���綢����,���扩增曲线��猂�‘。��。�。�������������������������������。��一标准曲线图��籊��������������������������籆�����������籊������������籊����������一����籄����������一���籄�����������’�籊�������������’��籄�������������籆������������籘���������������籊�������������籊������������’�伞�。���耐���万方数据
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