文档介绍:定量测定维生素C方法
1. 直接碘量法
2. 2,6-二***酚靛酚滴定法
1. 紫外快速测定法
2. 2,4-二硝基苯肼法
3. 高铁还原法测定血浆中抗坏血酸用)溶于1%草酸溶液中,并稀释至100ml,贮于棕色瓶中,冷藏。最好临用前配制。
% 2,6-二***酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二***酚靛酚溶于150ml含有52mg NaHCO3热水中,冷却后加水稀释至250ml,贮于棕色瓶中冷藏(4℃)约可保留一周。每次临用时,以标准抗坏血酸溶液标定。
维生素C的定量测定
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二、材料
苹果、卷心菜等。
三、器材
锥形瓶(100ml),组织捣碎器,吸量管(10ml),漏斗,滤纸,微量滴定管(5ml),容量瓶(100ml,250ml)。
四、提取
水洗洁净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果,用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取20g,加入20ml 2%草酸,用研钵研磨,四层纱布过滤,滤液备用。纱布可用少许2%草酸洗几次,合并滤液,滤液总体积定容至50ml。
五、标准液滴定
准确吸收标准抗坏血酸溶液1ml置100ml锥形瓶中,加9ml 1%草酸,% 2,6-二***酚靛酚溶液滴定至淡红色,并保持15s不褪色,即达终点。由所用染料体积计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸(取10ml 1%草酸作空白对照,按以上方法滴定)。
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六、样品滴定
准确吸收滤液两份,每份10ml, 分别放入2个锥形瓶内,滴定方法同前。另取10ml 1%草酸作空白对照滴定。
 
七、计算
式中:VA为滴定样品所耗用染料平均毫升数;
VB为滴定空白对照所耗用染料平均毫升数;
C为样品提取液总毫升数;
D为滴定时所取样品提取液毫升数;
T为1ml染料能氧化抗坏血酸毫克数;
W为待测样品重量(g)。
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紫外快速测定法定量测定维生素C
一、材料、仪器与试剂
    (一)材料:各种水果蔬菜、果汁及饮料。
    (二)仪器:紫外分光光度计、离心机、分析天平、容量瓶(10ml, 25ml)、移液管(,)、吸管、研钵。
    (三)试剂
    1.10%盐酸:取浓盐酸133ml,加水稀释至500ml。
    2.1%盐酸:取浓盐酸22ml,加水稀释至100ml。
    3.1mol/L氢氧化钠溶液:称取40gNaOH,加蒸馏水,不停搅拌至溶解,然后定容至1000ml。
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二、操作步骤
    (一)标准曲线制作
    1.抗坏血酸标准溶液配制:用分析天平准确称取抗坏血酸10mg,加2ml 10%盐酸,加蒸馏水定容至100ml,混匀。此抗坏血酸溶液浓度为100ug/ml。
2. 标准曲线绘制
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标准抗坏血酸溶液加入体积(ml)
总体积(ml)
抗坏血酸溶液浓度(ug/ml)
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3.消光值测定:以蒸馏水为空,在243nm处测定标准系列抗坏血酸溶液消光值,以抗坏血酸含量(ug)为横坐标,以对应消光值为纵坐标作标准曲线。
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二)样品测定    1.样品提取:将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。,加入2-5ml 1%盐酸,匀浆,转移到25ml容量瓶中,稀释至刻度。若提取液澄
清透明,则可直接取样测定,若有浑浊现象,可经过离心(1 0000g, 10min)来消除。
 2.样品测定:-,- 10%盐酸10ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以