文档介绍：医学检验毕业论文
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南通体臣卫校
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题目三种肺炎支原体检测法
的临床应用分析
地市: 南通市
学校: 体臣卫校
准炎病原体的辅助诊断方法,一定程度可区分细菌性肺炎与支原体肺炎。聚合酶链反应(PCR)技术检测MP具有可靠、特异性高的特点,逐渐成为早期特异诊断的有力武器。
1、5 肺炎支原体的实验室检查
急性期MPP患儿血清hs-CRP、C3、CA、IgM、IgG明显升高,IgA明显降低;而恢复期hs-CR、IgG仍然较高,而IgM与IgA均没有明显变化,补体C3、C4在恢复期内也没有明显变化,因此血清C-反应蛋白、免疫球蛋白与血清补体的监测对诊断急性期或恢复期MPP有重要意义。MP-IgM与冷凝集试验同时检测可提高小儿支原体肺炎实验诊断的准确率;支原体肺炎患儿外周血白细胞大多正常占80%,中性粒细胞增高占61%;65、6%患儿C-反应蛋白增高;53、6%患儿血沉增快;58、4%患儿心肌酶谱增高;24、0%患儿肝酶增高;16、8%患儿尿酸增高。5流行病学特点及进展
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MP肺炎发生率约为22、3%,9～12岁感染率最低,3～6岁最高,10～12月就是发病高峰月,小儿支原休肺炎发病率有所上升,发病年龄有趋小倾向,秋冬季发病率高,肺炎支原体只要通过呼吸道进行传播,尤其发病率较高的地区,局部区域每隔3-5年可发生一次肺炎支原体感染,每2-6年可发生一次大范围的肺炎支原体感染,每次感染的时间都持续较长,有的感染可持续一年左右,因此,有关部门一定要采取相应的预防措施,切断呼吸道飞沫传播途径对控制疾病发生与流行具有重大意义。控制支原体感染的发生与流行。
第二章材料与方法
2、1 样本
收集黄河中心医院检验科2013年1月1日～8月6日在儿科就诊住院患儿病例,有呼吸道感染症状,已经初诊为非细菌性感染的患儿362例作为研究对象,其中男175例,女187例;年龄为2个月～12岁,病程为1～90天。
2、2 方法
具体方法有:(1)用MP快速培养法、PCR法与MP-Ab法等3种MP检测法对362例研究对象同时进行检测,记录结果。(2)通过研究对象病历回顾统计MP感染的例数,并按年龄、病程与3种MP检测法结果进行统计学分析。
2、3 临床诊断MP感染的诊断标准
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按文献［1］、临床症状、体征标准,包括回顾性诊断——即患儿经红霉素治疗有效,经青霉素、头孢菌素治疗无效者等;以及实验室检查3种检测法至少有一种阳性。病程计算方法:以病历本记录为准,即在患儿开始有症状或体征时开始计算,到患儿来就诊检测时为止进行计算。
2、4 MP快速培养法
支原体分离鉴别培养液由珠海市浪峰生物技术有限公司提供。清晨患儿未洗漱用咽拭子取咽部分泌物,严格按说明书进行,将咽拭子用无菌生理盐水处理,接种到预温的培养基中,37 ℃培养;培养基液体颜色由紫红色变为草绿色或嫩绿色且清亮,并且在静置时,瓶底有蓝色颗粒或物质沉淀为阳性,5天后培养基颜色不变或无蓝色颗粒或物质沉淀为阴性。PCR法:试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。应用PCR法检测MP-DNA,严格按试剂盒说明书进行,以在紫外灯下出现180 bp扩增带结果判为阳性。每次试验均设阳性、阴性对照(阳性对照为MP质粒,阴性对照为无菌生理盐水),由专人进行操作,质量控制。MP-Ab法:试剂为日本瑞必欧株式会社MP-Ab检测试剂SERODIA-MYCOⅡ凝集试验试剂盒,严格按试剂盒说明书操作,抽取患儿静脉血3 ml,采用明胶颗粒被动凝集法,用血清检测,结果以≥1∶40判断为阳性。每次试验均设未致敏明胶颗粒、致敏明胶颗粒与阳性、阴性血清进行测定。
2、5 统计学方法
计量资料用均数±标准差(x±s)表示,各年龄组与3种检测方法结果比较用Spearman检验;各年龄组间确诊病例的阳性率比较用
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χ2检验;3种检测方法阳性结果与病程之间的比较用q检验。
第三章结果
3、1 阳性样本
经过回顾性诊断,在配对研究组362例研究对象中有152例符合MP感染的诊断标准,即有152例确诊病例,其中肺炎45例,支气管炎56例,上呼吸感染49例,支气管哮喘2例。MP快速培养法检测出78例阳性,PCR法检测出103例阳性,MP-Ab法检测出127例阳性。
3、2 结果分析
各确诊病例的年龄分布,见表1。表1显示儿童MP感染的年龄以3～4岁年龄段的