文档介绍：第9章色谱分析法
色谱法的原理
速率理论
气相色谱法
高效液相色谱法
色谱法的概述
色谱法的组成
固定相:填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相(固体或液体)。
流动相:自上而下运动的一相(一般是气体或液体)。
色谱柱:装有固定相的管子(玻璃管或不锈钢管)。
当流动相中的样品混合物经过固定相时,就会与固定相发生作用,由于各组分在性质和结构上的差异,与固定相相互作用的类型、强弱也有差异,因此在同一推动力作用下,不同组分在固定相滞留时间的长短不同,从而按先后不同的次序从固定相中流出。
色谱法分类
1. 按照流动相和固定相的物理状态分类
按流动相的物理状态:气相色谱法(流动相为气体)和液相色谱法(流动相为液体)。
按照固定相的物理状态不同,气相色谱法又可分为气固色谱法(固定相为固体物质)和气液色谱法(将不挥发液体固定在适当的固体载体上作为固定相);液相色谱法又可分为液固色谱法(固定相为固体)和液液色谱法(将固定液固定在适当的固相载体上作为固定相)。
超临界流体为流动相的色谱为超临界流体色谱(SFC)。
通过化学反应将固定液键合到载体表面,这种化学键合固定相的色谱又称化学键合相色谱(CBPC).
柱色谱法、毛细管色谱法、平板色谱法。
吸附色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法、亲和色谱法。
洗脱法、顶替法和迎头法。
色谱法分类
线性洗脱色谱及名词术语
分配系数K :
线性色谱:K为常数时所进行的色谱过程。溶质流过色谱柱时,分配系数大的组份通过色谱柱所需要的时间长,分配系数小的组份需要的时间短。当样品中各组份在两相的分配系数不同时,就能实现差速迁移,达到分离的目的。
色谱流出曲线
1. 基线:是柱中仅有流动相通过,检测器响应讯号的记录值。
2. 峰高:色谱峰顶点与基线之间的垂直距离,以h表示。
3. 保留值:
1) 死时间tm:不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时,从进样到出现峰极大值所需的时间。
2) 保留时间tr:试样从进样开始到柱后出现峰极大点时所经历的时间。
3) 调整保留时间tr’:扣除死时间后的保留时间。
tr’= tr - tm
色谱流出曲线
4. 死体积Vm:色谱柱在填充后,主管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间的总和。
Vm = tm · F0
5. 保留体积Vr:从进样开始到被测组份在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相体积。
Vr = tr · F0
’:扣除死体积后的保留体积。
Vr'= Vr - Vm
7. 相对保留体积γ2/1:某组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比,称为相对保留值。
色谱流出曲线
8. 分配比k:也称容量因子,组份在固定相和流动相中的分配量之比。它是衡量色谱柱对被分离组份保留能力的重要参数。
k与tr的关系:
k与分配系数K之间的关系:
色谱流出曲线