文档介绍：中国医科大学学报 ChiM eUniv 第 35 卷第2 期 2006 年4 月 · 19 5 ·
人类晶体上皮细胞的体外培养与观察
石磊，渡伟，归冬梅，高殿文方法，并且观察了H LEC 原代和传代细胞的生养皿中，显微镜下用角膜剪将前囊膜剪成细小碎片，
物学特征和组织学变化的特点。大小约为�m� ��mm 。用吸管将碎片移人2�m l
培养瓶底部，显微无钩镊辅助下将碎片不分正反面
1 材料与方法
全部贴附于培养瓶底面，倒置后加人少量完全培养
材料液保持瓶内湿润，再将倒置培养瓶放人37 ℃含5%
��D M EM 培养基(美国 Gibco 公司)、胎牛血清 COZ的培养箱内，4 h 后翻转加人适量的完全培养液
(美国Gibco 公司)、全反式维甲酸粉剂(美国 SIG- 培养 1周后，每3 d 换液 1 次，倒置显微镜下观察。
M A 公司)、其他试剂为国产分析纯。传代培养:上皮细胞在培养瓶底部长满融合
方法后，弃去原培养液，加人 0�25% 的胰蛋白酶和
完全培养液的配制:DM EM 干粉加人 15% % 的EDTA 混合液2��ml，在37 ℃孵箱内消化
的胎牛血清、10�U/ml的青霉素和 l001t,g/ml的链至贴壁细胞刚刚呈圆形，细胞周边出现亮反光环时，
霉素，再将培养液的pH � 不等细胞彼此分离，立即小心弃去消化液，加人完全
备用。
培养液2 一�ml终止消化，轻轻润洗原代细胞层后，
取材: 临床白内障患者在无菌条件下，进行
弃去培养液，用吸管冲洗培养瓶底的原代细胞层的
方法加人新的完全培养液，再用吸管反复吹打脱落
[作者简介〕石磊(1968 一)，男，讲师，博士，研究方向:后发性
��白内障. 的细胞大片，使细胞完全分离，再按