文档介绍：第六章酶与细胞固定化?直接应用酶的不足之处:(1)酶的稳定性差,在温度、pH和无机离子等外界因素的影响下,容易变性失活(2)酶通常在水溶液中与底物反应,反应结束后,即使仍有较高酶活力,也难于回收利用,成本较高,不便连续化生产(3)酶反应后成为杂质与产物混在一起,增加分离纯化的困难1固定化技术改善方法之一?思路设计一种方法,将酶束缚于特殊的相,,又有一般化学催化剂能回收,反复使用等优点,(1)固定化酶(2)固定化菌体(死细胞)(3)固定化活细胞(增殖细胞)(4)固定化原生质体(5)固定化动植物细胞2优点?(1)提高酶稳定性;?(2)可反复或连续使用;?(3)易于和反应产物分开;?(4)酶反应过程可严格控制;?(5)产物溶液无酶残留,简化提纯工艺;?(6)较游离酶更适合多酶反应;?(7)增加产物收率,提高产物质量;?(8)酶的使用效率提高,成本降低。缺点(1)固定化时酶活有损失;(2)增加了生产初始成本;(3)只能用于可溶底物且较小分子;(4)与完整菌体相比不适宜于多酶反应;(5)胞内酶须分离。3第一节第一节酶固定化酶固定化定义酶的固定化:将酶和菌体与不溶性载体结合的过程;固定化酶:在一定空间内呈闭锁状态存在的酶,能连续进行反应,反应后的酶可回收重复使用;概念发展“水不溶酶”(water insoluble enzyme)“固相酶”(solid phase enzyme)1971年第一届国际酶工程会议正式采用“固定化酶(immobilized enzyme)”4什么是固定化酶?水溶性酶水不溶性载体水不溶性酶(固定化酶)固定化技术5固定化酶制备原则(1)维持酶的催化活性及专一性;(2)有利于生产自动化、连续化;(3)应有最小的空间位阻;(4)酶与载体必须结合牢固;(5)应有最大稳定性,载体不与废物、产物或反应液发生化学反应;(6)成本要低。6一、酶固定化的方法?1、吸附法(link)?2、包埋法(link)?3、结合法(link)?4、交联法(link)?5、热处理法(link)7酶固定化方法示意图酶固定化方法示意图8吸附法用固体吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面上而使其固定的方法;固体吸附剂:活性炭、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等;(1)操作简单,条件温和,不会引起酶变性失活,载体廉价易得,可反复使用;(2)物理吸附结合能力弱,?将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中的固定化方法?多孔载体琼脂、海藻酸钠、角叉菜胶、明胶、聚酰***、火棉胶等(1)凝胶包埋法天然凝胶条件温和,操作简便,对酶活影响小,强度较差合成凝胶强度高,耐温度、pH值变化强,因需聚合反应而使部分酶变性失活适用性不适用于底物或产物分子很大的酶类的固定化10