文档介绍：仪器分析课程讲义
第三章高效液相色谱分析
目录
高效液相色谱法的特点
高效液相色谱法的主要类型及原理
高效液相色谱的分析原理
第一节、高效液相色谱法的特点
一、高效液相色谱法的特点:
1)高效(15 -35mPa)高压泵,高速,高压
2)高效(柱效约为30000n /米)高效固定相
3)高灵敏度(高灵敏度的检测器:紫外10-9g,荧光: 10-11g )
二、高效液相色谱方法的局限性
,且易引起环境污染
2. 缺少通用型检测器
3. 不能替代毛细管气相色谱法分析组成复杂的具有多种沸程的石油产品
4. 不能代替中、低压柱色谱法,分析受压易分解、变性的具有生物活性的生化样品。
三、 HPLC与经典LC区别
主要区别:固定相差别,输液设备和检测手段
:仅做为一种分离手段
柱内径1~3cm,固定相粒径>100μm 且不均匀
常压输送流动相;柱效低(H↑,n↓)
分析周期长、无法在线检测
:分离和分析
柱内径2~6mm,固定相粒径<10μm(球形,匀浆装柱)
柱效高(H↓,n↑)
高压泵输送流动相;
分析时间大大缩短、可以在线检测
四、HPLC与GC差别
主要差别:分析对象、流动相及操作条件的差别
GC:能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品,仅能分析有机物的20%.
HPLC:溶解后能制成溶液的样品,不受样品挥发性和热稳定性的限制。
分子量大、难气化、热稳定性差及高分子和离子型样品均可检测,占有机物的80%。
GC:流动相为惰性气体
组分只与固定相作用
HPLC:流动相为液体
流动相与组分间有亲合作用
流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用
GC:加温操作;
HPLC:室温;高压(液体粘度大)