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举例说明学习管理学的收获和体会35篇
第一篇:举例说明学习管理学的收获和体会3举例说明学习管理学的收获和体会
通过这半年来对《管理学》的学习,有了一些自己的心得和体会。管理就是特定的环境下,延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的dna得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有dna,(polymerasechainreaction,简称pcr)又称无细胞分子克隆或特异性dna序列体外引物定向酶促扩增技术。
3)原位杂交与原位pcr:
原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物。
原位pcr。是一种把原位杂交的细胞定位技术与pcr的高灵敏度相结合的技术,即通过pcr技术以dna为起始物,对靶序列在染色体上或组织细胞内进行原位扩增,使其拷贝数增加,然后通过原位杂交方法检测,从而对靶核酸进行定量定位分析。
(2)细胞因子mrna表达的检测常用的方法有northern印记,rt-pcr,原位杂交及原位pcr等。原位杂交是在组织细胞切片上用标记的核酸探针检测胞质内的特异mrna;而检测细胞内低拷贝mrna的方法则用原位rt-pcr。
1)northern印记杂交。northernblot被用于研究特定类别的rna分子的表达模式(丰度和大小),是一种将rna从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。rna印迹技术正好与dna相对应,故被称为northern印迹杂交。northern印迹杂交的rna吸印与southem印迹杂交的dna吸印方法类似,只是在进样前用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛使rna变性,而不用naoh,因为它会水解rna的2’一羟基基团。rna变性后有利于在转印过程中与硝酸纤维素膜结合,它同样可在高盐中进行转印,但在烘烤前与膜结合得并不牢固,所以在转印后用低盐缓冲液洗脱,否则rna会被洗脱。在胶中不能加eb,因为它会影响rna与硝酸纤维素膜的结合。为测定片段大小,可在同一块胶上加分子量标记物一同电泳,之后将标记物切下、上色、照相,样品胶则进行northern转印。标记物胶上色的方法是在暗室中将其浸在含5ug//l醋酸铵中10rain,光在水中就可脱色,在紫外光下用一次成像相机拍照时,上色的rna胶要尽可能少接触紫外光。若接触太多或在白炽灯下暴露过久,会使rna信号降低。琼脂糖凝胶中分离功能完整的mrna时,甲基氢氧化银是一种强力、可逆变性剂,但有毒,因而许多人喜用甲醛作为变性剂。所有操作均应避免rnase的污染。
2)rt-pcr。rt-pcr为反转录rcr(reversetranscriptionpcr)和实时pcr(realtimepcr)共同的缩写。逆转录pcr,或者称反转录pcr(reversetranscription-pcr,rt-pcr),是聚合酶链式反应(pcr)的一种广泛应用的变形。在rt-pcr中,一条rna链被逆转录成为互补dna,再以此为模板通过pcr进行dna扩增。rt-pcr的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的rna。rt-pcr广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种rna的含量。
3)原位杂交与原位rt-pcr:
原位rt-pcr。将组织样品经过固定液的固定,各种酶的处理,保留样品内的rna,经过反转录,将样品置于常规pcr仪中进行反应,不同的是所用的特异性引物在5’端带有荧光基团,反应完毕后,展片于载玻片上,在激光共聚焦显微镜下观察。可以用于某个基因在细胞内定位表达的观察。
第三篇:1举例说明学习庄子寓言的心得1举例说明学习庄子寓言的心得
庄子是道家学说的创始人,是中国著名哲学家、思想家、文学家、辩论家。庄子留给我们的,是他那些充满了寓言和小故事的文章。庄子一生穷困潦倒,却能超越贫困乐在其中,庄子能言善辩,尤其善用寓言和小故事来表达自己的观点,同时嘲讽那些追名逐利的小人。庄子的文章充满了想象,充满了尖