文档介绍：蛋白质的稳定性和稳定化
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第一节: 蛋白质的稳定性
一. 蛋白质稳定性的分子原因
蛋白质的稳定性: 蛋白质抵抗各种因素的影响,保持其生物活力的能力。
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维持蛋白质结构稳定。因此，沉淀很容易再溶于水溶液中，并恢复其全部天然特性。
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三、极端pH:
极端pH下引起蛋白质变性的重要因素是：一旦远离了蛋白质的等电点的，那么蛋白质分子内相同电荷间的静电斥力会导致蛋白质伸展。从而使埋藏在蛋白质内部非电离残基发生电离，导致失活。
pH的变化可以引起蛋白质的伸展,这个过程原则上是可逆的,但这些变化常能导致不可逆的聚合或酶的自溶,引起不可逆失活.
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四、氧化作用:
各种氧化剂能氧化带芳香族侧链的氨基酸以及蛋氨酸、半胱氨酸和胱氨酸残基，从而使蛋白质变性。分子氧、H2O2和氧自由基是常见的蛋白质氧化剂。
五、表面活性剂和去污剂
表面活性剂在很低浓度下能使蛋白质发生强烈的相互作用,.
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六、变性剂：
:机制尚不明确,可能是消除了维持三级结构的疏水作用力或直接与蛋白质分子作用.
：高浓度盐既有稳定作用也有变性作用，这要看盐的性质和浓度。
：常常不可逆地失活需要金属辅因子的酶，但可稳定不需要金属辅因子的酶；
：改变溶液的介电常数;增加疏水核的溶解度,降低带电表面的溶解度;夺去酶分子表面的必需水而使酶失活.
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七、重金属离子和巯基试剂:
与蛋白质的巯基、二硫键以及色氨酸、组氨酸残基反应。
八、热:
:伸展---不可逆失活.
九、机械力：
振动、剪切、超声波、压力都可能引起蛋白质的变性。这种变性理论上是可逆的，但也可能伴随着其他反应而不可逆地失活.
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十、冷冻和脱水：
冷冻和脱水时，溶质被浓缩，引起酶微环境中pH和离子强度的剧烈改变，减弱疏水相互作用,并可能引起二硫交换和巯基的氧化。
十一、辐射作用:
辐射可产生自由基(.OH,H2O2,O2-.等)直接或间接地作用于蛋白质分子.
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第三节蛋白质的稳定化
酶的稳定化方法
固定化
非共价修饰
化学修饰
④蛋白质工程
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一固定化
固定化可通过下列效应影响酶的稳定性：
空间障碍：由于空间障碍可以防止蛋白水解酶的作用，阻挡酶与化学失活剂的接触，同时阻碍氧向酶的扩散可以保护对氧不稳定的酶
扩散机制: 使酶发生交联或包埋在载体紧密的孔中可以使酶的构象更加坚牢，从而阻止酶构象从折叠态向伸展态过渡。
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一酶固定到载体上后可产生空间障碍，结果其他大分子难于与酶作用，因此，固定到载体上的酶往往能抵抗蛋白水解酶的降解作用，这也是防止蛋白水解酶自溶的原因
二底物、配体和氢离子浓度在载体附近和整体溶液之间的分布不均一，造成载体周围的局部浓度与整体浓度不同，也就是酶的微环境发生了变化
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三当酶包埋在多孔颗粒内，底物必须先扩散到颗粒表面（外部质量传递），然后进入颗粒内部（内部质量传递），酶才能与其作用，这些扩散限制可明显使固定化酶“稳定化”
外扩散：底物必须从流动的水溶液传递到固定化酶颗粒外表面
内扩散:底物进一步传递到固定化酶颗粒内部
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四将酶多点共价连接到载体表面，或用双功能试剂交联酶，或将酶包埋在载体紧密的孔中，可以使酶构象更加坚牢，从而阻止酶构象从折叠态向伸展态过渡。
A B C
；

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二、非共价修饰
反相胶