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血型交叉配血.ppt

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血型交叉配血.ppt

文档介绍

文档介绍:血型交叉配血
主要内容:
红细胞血型概述
抗体检查和鉴定
穿插配血方法
日常工作中问题对策
2021/1/12
2
血型的发现
1900年,奥地利科学家兰德斯坦纳
红细胞
血清
凝集
不凝集
遇到
2023遍后倾倒上清液,控干,加2滴抗人球蛋白试剂,离心后判读结果。
2021/1/12
16
PEG-IAT
原理:PEG〔聚乙二醇〕是一种水溶性的中性多聚体,当含有抗原与相应抗体的溶液中参加PEG时,由于空间排斥效应作用,使溶液中的抗体饱和度进步,加速溶液中的抗原-抗体复合物的形成。
程序:2滴血清、1滴2-5%的红细胞,加4滴PEG溶液后混匀,37℃孵育15分钟,生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液,控干,加2滴抗人球蛋白试剂,离心后判读结果。
2021/1/12
17
微柱凝胶技术(卡)
原理:微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶颗粒具有分子筛作用,离心后,不凝集的红细胞通过全程进入微管底部,而凝集的红细胞那么悬浮停留在颗粒中。
程序:按厂家说明操作
2021/1/12
18
反响原理
微柱凝胶免疫反响的本质是红细胞凝集试验,也可称之微柱凝胶血凝
试验〔Microcolumn Gel Heamagglutination Assay,MGHA〕在微柱凝胶
管中,红细胞和相应抗体结合后,形成红细胞凝集团块。在一定离心力下,
该凝集团块位于胶外表或胶中;而红细胞未和相应抗体结合,仍为分散的
红细胞,在同样的离心力下,红细胞沉降到微柱管尖底部。
2021/1/12
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4+ 红细胞复合物〔凝集〕位于凝胶外表
3+ 大部分红细胞复合物位于凝胶外表,少部分位于凝胶中部
2+ 大部分红细胞复合物位于凝胶中部,少部分位于凝胶中上部
1+ 红细胞复合物位于凝胶中下部
± 与同一卡中阴性管结果对照,如与阴性结果有差异,即为±
— 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部
完全溶血 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞,液体出现透明清澈红色
不完全溶血 残留红细胞在胶外表、胶中或胶底部,液体出现透明清澈红色
混合凝集 红细胞复合物位于凝胶外表和凝胶底部
反响强度
现象及说明
4+  3+ 2+ + ± - H H M
完全 不完全 混合凝集
2021/1/12
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抗人球蛋白试验(Coombs试验)
直接抗人球蛋白试验(DAT)
检测红细胞是否在体内被抗体或补体致敏,用于检测自身免疫溶血性贫血、药物引起的溶血、新生儿溶血病、溶血性输血反响
间接抗人球蛋白试验(IAT)
在体外抗体致敏红细胞,用于抗体挑选和鉴定、穿插配血、血型鉴定
2021/1/12
21
酶试验
原理:蛋白水解酶可将红细胞外表的多肽链打断,使多肽链带负电荷的唾液酸也一起分开红细胞外表,减少了红细胞之间的排斥力,缩短了红细胞之间的间隔 ,容易产生凝集反响
程序:2滴血清、1滴2-5%红细胞,参加2滴酶,37℃孵育15分钟,离心看结果。
注:酶会破坏一些抗原构造,如M、N、Fya、Fyb 等
2021/1/12
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影响输血效果的免疫血清学问题
速发型输血后溶血反响
血管内溶血
主要原因: ABO血型不和
迟发型输血后溶血反响
血管外溶血
主要原因: 针对红细胞抗原的同种抗体
血型抗原的同种免疫
红细胞抗原免疫强弱依次为Rh〔D>E >C >c >e 〕、 Kell、Duffy、Kidd

2021/1/12
23
传统方法的局限性
不利于标准化管理
重复性较差
要求操作者的经历丰富
难以实现自动化操作
2021/1/12
24
凝胶凝集试验
2021/1/12
25
凝胶凝集试验 - 原理 (1)
通过离心使红细胞被挤过装有过滤介质的小柱
凝集的红细胞被阻挡在小柱中过滤介质的顶部或中央, 而未凝集的红细胞那么到达小柱的底部