文档介绍:1
【目的要求】
实验三
丹皮酚小肠吸收实验
。
,测定丹皮酚在大鼠小肠的吸收速度常数(
K),半衰期(tl/2)
以及每小时吸收率。
【实验材料】
(- s>o pe
t1/2
dX/dt为吸收速度;
X为吸收部位药物量;
Xo为t=0时吸收部位药物量;
tl/2为半衰期;
Ka表观一级吸收速率常数。
酚红的标准曲线绘制:精密称取酚红 20 mg,置100 mL容量瓶中,加 Krebs-Ringer磷
酸缓冲液溶解并稀释至刻度,制成 200卩g/mL储备液。吸取上述溶液 , , , ,
mL置于100 mL的容量瓶中, mol/L的NaOH定容至100 mL,, ,
, , Mg/mL。 mol/L NaOH 溶液为空白,558 nm测定吸收度, 以吸收度 A
与酚红浓度C(u g/mL)进行线性回归。
丹皮酚标准曲线的绘制: 精密称取丹皮酚10 mg置100 mL容量瓶中,以K-R缓冲液定
容至100 mL,制成100卩g/mL储备液。, , , mL的储备液于10 mL容
量瓶中加K-R缓冲液定至刻度,即浓度分别为 , , , -R缓冲液
为空白,274 nm测定吸收度,以吸收度 A与丹皮酚浓度C( g/mL进行线性回归。
【实验方法】
(一)酚红液配制(20 Ag/mL)
称取酚红20 mg后,加入少量蒸馏水混悬, 加入少量碳酸氢钠并微热使溶解 (必要时滴
加数滴1 N NaOH 液),得甲液。另将 Krebs-Ringer缓冲液的其它成分用蒸馏水溶解,得乙
液。将甲液缓缓加入乙液中,添加适量蒸馏水至
1000 mL,即得。
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4
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(二)供试液配制
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称取丹皮酚10 mg,加入含酚红20卩g/mL的酚红液50 mL , 37 C水浴并超声使溶解。
称取丹皮酚制剂(含丹皮酚 10 mg )充分研磨,加入含酚红 20 i g/mL的酚红液50 mL , 37 C水浴并超声使溶解。
(三)实验步骤
大鼠麻醉:取禁食 12 h(自由饮水)200亠250 g的雄性大鼠,按1 g/kg乌拉坦(20%)溶 液作腹腔注射麻醉(翻正反射消失),并背位固定于手术台板上。
4 cm),在距离胃幽门 15 cm
小肠两端插管:沿腹部正中线(腹白线)切开腹部(约
和25 cm处各插入细玻璃管并用线扎紧, 缝合切口(不缝合,上覆以浸有生理盐水的纱布)。
洗涤肠管:用37 C生理盐水缓缓注入肠管,洗去肠管内容物,充分洗净后送入空气 使洗涤液尽量流尽。
作成回路:吸取供试液 50 mL,从空肠上部进入肠管流经空肠后再流入贮液瓶中,
按下图所示作成回路