文档介绍：二、大会发言·儿科·一采集婴儿口腔粘膜细胞⒁恢植饬坑ざ居Q男路椒上海交通大学医学院附属上海新华医院,上海市儿科医学研究所陈菲张伟利蒋明华何稼敏对象与方法必需脂肪酸对婴儿营养十分重要,尤其一些长链多价不饱和脂肪酸,如二十二碳六烯酸和花生四烯酸是婴儿脑和视网膜的重要组成成份。以往我们要了解婴儿体内的脂肪营养状况主要是通过采集婴儿的罕瓯纠唇胁舛āS捎谟ざ裳1冉侠眩沂谴瓷诵缘模沂敉蝗菀捉邮堋S绕湟6阅车厍婴儿进行较大样本的营养调查时,就需要有一种简单、方便、易行的方法。最近我们通过采集婴儿口腔颊粘膜细胞的方法来测定婴儿体内的脂肪酸成份。为了解测定婴儿口腔颊粘膜细胞能否反映婴儿体内脂肪的营养状况,我们将口腔颊粘膜细胞中脂肪酸的测定结果与血浆和红细胞膜中的测定结果进行比较。现将婴儿口腔粘膜细胞中脂肪酸的测定方法,以及与血浆和红细胞膜中的测定结果比较如下:韵从年日至月日采集了在上海交通大学附属新华医院住院的新生儿共例,日龄欤平均日龄天,其中早产儿胎龄~周阍露胎龄~周K腥胙〉男律璺弦下标准:拗舷⑶谰炔∈贰ざ唇芯猜鲇Q奘銳坝跋斐Φ烙Q盏牟∈贰淠盖自谠衅谟忍悄虿。岷瞬。咧V⒒,,采用氢焰离子化检测器J荽恚翰捎谜愦笾谴颪色谱数据工作站进行数据分析,采用内标法计算峰面积。<缚谇患照衬け瓯镜牟杉使用台湾林哥婴儿用品有限公司生产的适用于新生儿和婴儿的乳牙刷,该婴儿刷可戴在操作者的手指上伸入婴儿口腔内采集婴儿颊粘膜标本。当符合条件的新生儿需采血进行其它实验聿检查时,同时留取约难R罕瓯尽在采血当天同时采集婴儿口腔颊粘膜标本。为了避免婴儿口腔中奶汁对测定的干扰,婴儿口腔颊粘膜细胞的采集在··
结进食前进行。并且在采集前用的生理盐水清洁婴儿口腔。操作时由助手扶住新生儿头部,用消过毒的婴儿专用婴刷轻刮婴儿口腔粘膜表面,每刮下后将婴刷放在生理盐水中洗涤,如此反复约次,然后再采集另一侧的口腔颊粘膜细胞。两侧可交替进行。将采集的颊粘膜细胞收集在清洁的玻璃试管中,在#郑离心分钟,。血标本采集:将采集剑的婴儿血标本放在含有的抗凝管中,嫦#郑胄分离血浆和红细胞,将血浆置于.℃冰箱冷藏待测。红细胞用生理盐水反复洗加入生理盐水,#掷心分钟,将上清液弃去,重复。再加入袅笏购煜赴苎#缓笤下转/分离心∈保用移液管将上清液吸去,留在试管底部的乳白色红细胞膜沉淀物在氮气下吹干,然后放入姹淅洳卮狻舅岢煞莸牟舛ǎ采用直接酯化一步法对上述各种标本中的总脂肪酸进行抽提和酯化。将脂肪的抽提物通过气相色谱仪进行脂肪酸成份的分析。臣蒲Х椒所有实验数据用均值±标准差表示,。煅榻凶榧淞搅奖冉稀5笔莶宦惴讲钇胄约煅槭保蚪蠰转换后再进行方差齐性检验。若仍不满足方差齐性要求,则用非参数统计方法,甒蚆甒煅榻凶榧淞两比较,结果用计算后所得的校正后的检验水准尽治觥A搅较喙胤治霾捎肞相关检验。若满足相关则进一步用检验回归方程的显著性。果髯楸瓯局懈髦舅岷康那榭觯莞髦舅岚俜趾康母叩团判颍谐龊空记位的脂肪酸。由表中可见各组中占前几位的均是和碳的长链脂肪酸。颊粘膜细胞组与血浆组前四位的脂肪酸排序相同,分别是:,:。在红细胞膜组中显示出较长链的脂肪酸百分含量较高。组脂肪酸的组成情况在系脂肪酸中:和:.诟髯榧渚邢灾圆钜臁?谇患照衬は胞中的:最低.%=秃煜赴蟹直鹗和.%琾.。相反的是,口腔颊粘膜细胞中的:.罡,而血浆和红细胞中则分别是.%,:患照衬は赴的:一,低于衄浆组的.%秃煜赴榈,系脂肪酸中,:在各组间均有显著性差异。口腔颊粘膜细胞中的含量.%血浆.%红细胞。:在血浆中最高,其次为患照衬は赴.%煜赴ぶ形,各组间有显著统计学差异,此外,.±。总的系脂肪酸含量则是红细胞膜中最高.±,腔颊粘膜细胞中最低..和:.,口腔颊粘膜细胞巾的和暮坑胙=淼暮烤喙兀喙叵凳齬分别为..,而口腔颊粘膜细胞与红细胞膜中的和暮烤幌喙亍8菁扑懔谐隹谇患照衬は赴胙=械腁虳含量相关的直线回归方程【;血浆中.·‘
本实验结果显示新生儿口腔颊粘膜细胞中的从和坑胙=械腁虳显著相关。但是与红细讨论×口腔颊粘膜细胞中潜冉显绮胱阍露诳谇患照衬は赴=秃煜赴ぶ械腁隓的含量。早产儿与足月儿在口腔颊粘膜细胞巾的坑邢灾臣蒲Р钜谘=秃煜赴ぶ芯尴灾臣蒲Р钜臁多年来对婴儿脂肪营养的研究均需采集婴儿的标本,婴儿采血较为困难,而且是一种创伤性的方法,人们希望能有一种兀创的方法来进行