文档介绍：酶六章酶的固定化
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酶催化的优点 ——作为一种生物催化剂，酶参与生物体内的各种代谢反应，具有专一性强、催化效率高及作用条件温和等优点。
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酶催化的缺陷 ——酶对化的载体必须有一定的机械强度，不能因机械搅拌而破碎或脱落。
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原则3 ——固定化酶应有最小的空间位阻，尽可能不妨碍酶与底物的接近，以提高产品的产量，制备固定化酶时所选载体应尽可能地不阻碍酶和底物的接近。
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原则4 ——酶与载体必须结合牢固，从而使固定化酶能回收贮藏，利于反复使用，因此，在制备固定化酶时，应使酶和载体尽可能地结合牢固。
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原则5 ——固定化酶应有最大的稳定性，在制备固定化酶时，所选载体不与废物、产物或反应液发生化学反应。
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原则6 ——固定化酶应能保持甚至超过原有酶液的活性，在制备固定化酶时，酶和载体结合部位不应是酶的活性中心或与维持酶高级空间结构有关的基团，因此，应尽可能预先保护这些基团；
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原则7 ——固定化酶应易与产物分离，即能通过简单的过滤或离心就可回收和重复使用；
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原则8 ——固定化酶成本要低，应为廉价的、有利于推广的产品，以便于工业使用。
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酶的固定化方法 ——酶的固定化方法很多，但对任何酶都适用的方法是没有的。
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酶的固定化方法通常按照用于结合的化学反应的类型进行分类
固定化方法
分类
非化学结合法
结晶法
分散法
物理吸附法
离子结合法
化学结合法
交联法
共价结合法
包埋法
微囊法
网格法
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（一）非共价结合法 ——1结晶法 ——2 分散法 ——3 物理吸附法 ——4 离子结合法
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结晶法 ——就是使酶结晶从而实现固定化的方法。 ——对于晶体来说，载体就是酶蛋白本身。 ——提供了非常高的酶浓度。对于活力较低的酶来说，这一点就更具优越性。
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结晶法的局限性 ——在不断的重复循环中，酶会有损耗，从而使得固定化酶浓度降低。
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2 分散法 ——通过酶分散于水不溶相中从而实现固定化的方法。 ——对于在水不溶的有机相中进行的反应，最简单的固定化方法是将干粉悬浮于溶剂中，并且可以通过过滤和离心的方法将酶进行分离和再利用。
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对于用在水不溶性溶剂中的固定化酶，有许多途径可以提高它们的反应速率
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①正确的体系和贮存状态使酶粉末充分分散，将有助于提高活力。 ——在干燥过程中，加入多种化合物有助于酶的分散，这些化合物也作为稳定剂和保护剂发挥作用。
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②通过与亲脂化合物的共价连接 能增加酶在有机相中的溶解度 ——可以通过将其包埋在膜体系中或通过多相反应来实现酶的固定化。
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③酶的固定化。 ——将酶简单地吸附到多孔载体中就能显著地增加单一催化中心的获得，并且易于从产物中分离酶。 ——交联的晶体需要表面活性剂来补偿它们在有机相中的低活力。
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3. 物理吸附法 ——酶被物理吸附于不溶性载体的一种固定化方法。
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载体 ——无机载体有多孔玻璃、活性炭、酸性白土、漂白土、高岭石、氧化铝、硅胶、膨润土、羟基磷灰石、磷酸钙、金属氧化物等； ——天然高分子载体有淀粉、白蛋白等； ——大孔型合成树脂、陶瓷等载体也十分引人注目； ——具有疏水基的载体（丁基或已基­-葡聚糖凝胶）可以疏水性吸附酶，以及以单宁作为配基的纤维素衍生物等载体。
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物理吸附法也能固定微生物细胞，并有可能在研究此法中开发出固定化增殖微生物的优良载体。
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物理吸附法具有酶活性中心不易被破坏和酶高级结构变化少的优点，因而酶活力损失很少。 ——若能找到适当的载体，这是很好的方法。 ——但是它有酶与载体相互作用力弱、酶易脱落等缺点。
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4. 离子结合法 ——酶通过离子键结合于具有离子交换基的水不溶性载体的固定化方法。
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载体 ——阴离子交换剂如DEAE-纤维 素，DEAE-葡