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酶六章酶的固定化.ppt

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酶六章酶的固定化.ppt

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酶六章酶的固定化.ppt

文档介绍

文档介绍:酶六章酶的固定化
第1页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
酶催化的优点 ——作为一种生物催化剂,酶参与生物体内的各种代谢反应,具有专一性强、催化效率高及作用条件温和等优点。
第2页,共158页,20定化酶的制备原则 ——固定化酶的应用目的、应用环境各不相同,而且可用于固定化制备的物理、化学手段、材料等多种多样。
第16页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
制备固定化酶要根据不同情况(不同酶、不同应用目的和应用环境)来选择不同的方法,但是无论如何选择,确定什么样的方法,都要遵循几个基本原则
第17页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则1 ——必须注意维持酶的催化活性及专一性,保持酶原有的专一性、高效催化能力和在常温常压下能起催化反应的特点。
第18页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则2 ——固定化应该有利于生产自动化、连续化。为此,用于固定化的载体必须有一定的机械强度,不能因机械搅拌而破碎或脱落。
第19页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则3 ——固定化酶应有最小的空间位阻,尽可能不妨碍酶与底物的接近,以提高产品的产量,制备固定化酶时所选载体应尽可能地不阻碍酶和底物的接近。
第20页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则4 ——酶与载体必须结合牢固,从而使固定化酶能回收贮藏,利于反复使用,因此,在制备固定化酶时,应使酶和载体尽可能地结合牢固。
第21页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则5 ——固定化酶应有最大的稳定性,在制备固定化酶时,所选载体不与废物、产物或反应液发生化学反应。
第22页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则6 ——固定化酶应能保持甚至超过原有酶液的活性,在制备固定化酶时,酶和载体结合部位不应是酶的活性中心或与维持酶高级空间结构有关的基团,因此,应尽可能预先保护这些基团;
第23页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则7 ——固定化酶应易与产物分离,即能通过简单的过滤或离心就可回收和重复使用;
第24页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
原则8 ——固定化酶成本要低,应为廉价的、有利于推广的产品,以便于工业使用。
第25页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
酶的固定化方法 ——酶的固定化方法很多,但对任何酶都适用的方法是没有的。
第26页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
酶的固定化方法通常按照用于结合的化学反应的类型进行分类
固定化方法
分类
非化学结合法
结晶法
分散法
物理吸附法
离子结合法
化学结合法
交联法
共价结合法
包埋法
微囊法
网格法
第27页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
(一)非共价结合法 ——1结晶法 ——2 分散法 ——3 物理吸附法 ——4 离子结合法
第28页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
结晶法 ——就是使酶结晶从而实现固定化的方法。 ——对于晶体来说,载体就是酶蛋白本身。 ——提供了非常高的酶浓度。对于活力较低的酶来说,这一点就更具优越性。
第29页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
结晶法的局限性 ——在不断的重复循环中,酶会有损耗,从而使得固定化酶浓度降低。
第30页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
2 分散法 ——通过酶分散于水不溶相中从而实现固定化的方法。 ——对于在水不溶的有机相中进行的反应,最简单的固定化方法是将干粉悬浮于溶剂中,并且可以通过过滤和离心的方法将酶进行分离和再利用。
第31页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
对于用在水不溶性溶剂中的固定化酶,有许多途径可以提高它们的反应速率
第32页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
①正确的体系和贮存状态使酶粉末充分分散,将有助于提高活力。 ——在干燥过程中,加入多种化合物有助于酶的分散,这些化合物也作为稳定剂和保护剂发挥作用。
第33页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
②通过与亲脂化合物的共价连接 能增加酶在有机相中的溶解度 ——可以通过将其包埋在膜体系中或通过多相反应来实现酶的固定化。
第34页,共158页,2022年,5月20日,20点59分,星期三
③酶