文档介绍：人CD147酶联免疫分析试剂盒使用说明书
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 CD147。用纯化的人 CD147抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 CD147，再与 HRP标记的 CD147抗体
人CD147酶联免疫分析试剂盒使用说明书
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 CD147。用纯化的人 CD147抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 CD147，再与 HRP标记的 CD147抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 CD147呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人
CD147浓度。
试剂盒组成
30倍浓
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8条
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
终止液
6ml×1瓶
×1瓶
×1瓶
标准品（40µg/L l）
标准品稀释液
A液
B液
2张
1个
标本要
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过（HRP）活性。
人CD147酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
20µg/L
10µg/L
5µg/L
5号标准品
4号标准品
3号标准品
2号标准品
1号标准品
150µl的原倍标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 5号标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 4号标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 3号标准品加入 150µl标准品稀释液
150µl的 2号标准品加入 150µl标准品稀释液
µg/L
µg/L
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后
37℃温育30分钟。
20倍稀释后备用
配液：将 20倍浓
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静
重复 5次，拍干。
30秒后弃去，如此
加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
温育：操作同 3。
洗涤：操作同 5。
显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10分钟.
：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
：以空白空调零，