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临床生化实验室基本知识.ppt

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文档介绍:临床生化实验室基本知识
第三章 生物化学检验实验室基本知识
第一节 实验用纯水
天然水
自来水
实验用纯水
经简单的物理、化学方法处理,除去悬浮物质和部分无机盐
经蒸馏、电渗析等处理,除去杂质
程度。
精密度自身无量度指标,常用标准差6)或变异系数(CV%)表示。值得注意的是使用标准差及变异系数时,应说明实验的重复次数及其均值。
精密度
连续测定的精密度
重复性精密度
再现性精密度
1.连续测定的精密度
在相同条件下,对同一标本连续进行n次重复测定结果的符合程度。在有限次测定情况下,一般用。(总体标准差)的估计值S(样本标准差)来表达这种精密度。
2.重复性精密度
重复性精密度(rePeatabllty Precision)又称室(批)内精密度,指在相同条件下(同样方法、同一种试剂和标准品、同样仪器、在同一实验室由同一人操作,并要保持实验期间准确性不变)对同一标本在尽可能短的时间内进行m轮n次重复测定结果之间相互接近的程度。重复性(批内)精密度(S。)
3.再现性精密度
再现性精密度(reproductivity precision)又称室(批)间精密度,指在不同条件下(不同操作者,用不同仪器,在不同实验室和不同时间)采用同一方法对同一标本所获得的单次测定结果之间彼此符合程度。
再现性精密度既包括了不同操作者的误差,也包括了不同条件下的仪器误差,所以对检验方法的再现性作估计时,所要采用的方法比估计重复性更为复杂。
再现性精密度多用于实验室间的质量估计,其标准差常称为室间标准差。室(批)间标准差,是在对室(批)间重复性试验结果进行单因素完全随机设计方差分析后进行计算。
(二)准确度
准确度(accuracy)是指测定结果与真值接近的程度,一般用偏差和偏差系数表示。偏差为重复测定均值(天)与真值之差
准确度主要受系统误差支配(系统误差愈小,准确度越高),也受随机误差的影响,所以准确度是表示测定结果中系统误差和随机误差的综合。
不确定度(uncertainty)是表达测定结果的一个组成部分,它表明被测标本中真值存在的范围,通常所说的误差是指测定结果与真值偏离的程度;准确度是指测定结果与真值接近的程度。可见误差和准确度从相反角度表达了同一事物。
(三)特异度和干扰
特异度(sPecificity)即专一性,是指在特定实验条件下分析试剂只对待测物质起反应,而不与其它结构相似的非被测物质发生反应。分析方法特异度越高,则测定结果越准确。于找(interference)是指标本中某些非被测物质本身不与分析试剂反应,但以其它形式使待测物测定值偏高或偏低,这些非被测物质称为干扰物。如果分析试剂与标本中被测物质以外的成分反应,则属特异度差;如果加人的物质影响了被测定物与试剂间的反应,则是被干扰。例如用邻甲苯***试剂测定血糖,除葡萄糖外半乳糖、甘露糖等也能与试剂反应,产生与葡萄糖相似的吸收光谱,引起正误差,这是特异度不足所致。GOD-POD法测定血糖中,尿酸可和由葡萄糖氧化酶作用产生的 HZ O。反应,使部分 HZ*不能参与过氧化物酶的第M步反应,造成显色程度下降。尿酸本身未与试剂直接反应,但对该方法有于扰。
(四)检测能力
检测能力即检测限度或检出限(detection limit),是指能与适当的“空白”读数相区别的待测物的最小值。空白读数是指由基质、试剂所得的读数和结果,以及由仪器或测定过程所产生的影响测定步骤的残余偏差。对于某一分析方法,应确定检出限,便于与其它方法的检测能力相比较,避免标本中待测物含量接近或低于检出限
确定检出限时,首先选择合适的空白标本,多次测定(一般20次)其吸光度,求得平均吸光度及其标准差;然后重复测定接近空白的标本,计算标准差;最后选定一合适的单值统计试验及可接受的机率作为有意义的水平。为简便计算,可用“空白读数十3S”代表检出限。
四、评价实验
评价实验包括
重复性实验、
回收实验、
于扰实验
方法比较实验。
重复性试验
实验的目的是检测候选方法的随机误差。方法是对同—材料(标准液、质控液、标 本等)分成数份试验标本进行多次分析测定,并计算其均数、标准差与变异系数。
(1)批内
(2)日内
(3)日间
(4)平行双份
作重复性试验时应注意的问题
(1)分析标本选择:标准液、控制物、病人标本均可,视用途而定。批内重复性试验时,用标准液可以得到各种不同的浓度,较简便,代表了最好的重复性。若结果满意说明方法操作适宜,可进一步用其它标本测定,否则应改进方法或另选方法。日间重复性试验时,用冻干质控血清较好,