文档介绍：第十章
常用分子生物学技术的原理及应用
The Popular Technology in Molecular Biology: Principle and Application
第一节 分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization & Blotting Technology
核酸分子杂交(nucleic acid hybridization )
在DNA复性过程中,如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中,或把DNA与RNA放在一起,只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系,就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。
一、分子杂交与印迹技术的原理
复性
RNA
DNA
(一)印迹技术
(二)探针技术
探针(probe)
一小段用同位素、生物素或荧光染料标标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸,与固定在NC膜上的核苷酸结合,判断是否有同源的核酸分子存在。
二、印迹技术的类别及应用
(一)DNA印迹技术(Southern blotting)
用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。
(二)RNA印迹技术(Northern blotting)
用于RNA的定性定量分析。
(三)蛋白质的印迹分析(Western blotting)
用于蛋白质定性定量及相互作用研究。
其他
斑点印迹(dot blotting)
原位杂交(in situ hybridization)
DNA点阵(DNA array)
DNA芯片技术(DNA chip)
三种印迹技术的比较
分子杂交实验
①
②
③
目录
放射自显影照片
目录