文档介绍：实验四细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别
一、目的要求
掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的原理、方法、结果判定以及在诊断中的运用
熟悉大肠杆菌和沙门菌主要培养特性和常规微生物学诊断方法
通过本实验加深理化因素及生物因素对实验四细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别
一、目的要求
掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的原理、方法、结果判定以及在诊断中的运用
熟悉大肠杆菌和沙门菌主要培养特性和常规微生物学诊断方法
通过本实验加深理化因素及生物因素对微生物的影响的概念
二、实验材料
菌种：大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巴氏杆菌
培养基：葡萄糖高层琼脂、普通琼脂斜面、水琼脂斜面、氧化-发酵培养基（小生化管）、普通平板、麦康凯平板、淀粉平板、三糖铁斜面、各类生化反应管等
器械：砂轮、试管架、接种环、接种针、灭菌吸管、灭菌刻度移液管、灭菌棉签、胶头、灭菌液体石蜡、酒精灯、废报纸等
三、实验内容
1、细菌对空气（氧气）的需要
菌种：大肠杆菌、枯草杆菌
方法：用吸管将两种菌各加入两支己溶化的葡萄糖深层琼脂管中，
培养基：葡萄糖深层琼脂（己溶化）
2、细菌对营养的要求
菌种：大肠杆菌、巴氏杆菌
培养基：斜面（水琼脂、普通琼脂）
方法：划线的方法
（一）细菌的生理生化试验
3、细菌氧化型与发酵型（O/F）的测定
菌种：大肠杆菌、枯草杆菌
培养基：加有葡萄糖和指示剂（1%溴麝香草酚蓝）的微型发酵管
方法：用接种针将两种菌各加入两支发酵管中，从不同菌里各取一管加入灭菌的液体石蜡，37 ℃正置培养。
产酸（浅绿色黄色）
4、淀粉水解试验
菌种：大肠杆菌、枯草杆菌
培养基：普通营养琼脂平板
方法：一块平板上，一边划大肠杆菌，一边划枯草杆菌，第二天长出菌后，在菌落上滴加碘液。
5、触酶（过氧化氢酶）试验
菌种：大肠杆菌、枯草杆菌
培养基：普通营养琼脂平板
方法：一块平板上，一边划大肠杆菌，一边划枯草杆菌，第二天长出菌后，在菌落上滴加H2O2
（二）肠杆菌科的鉴别（大肠杆菌&沙门菌）
肠杆菌科的生化试验
1、麦康凯琼脂平板
（乳糖、胆盐、指示剂：1%中性红）
方法：划线，分解乳糖菌落变红
2、三糖铁琼脂斜面
（葡萄糖、蔗糖、乳糖、硫酸亚铁铵、指示剂：%酚红）
方法：先划斜面再穿刺
：圆纸片扩散法
菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌
培养基：营养琼脂平板
方法：

菌种：大肠杆菌、枯草杆菌
方法：与药敏试验方法是一样的（纸片扩散法）
将以上接好细菌的培养基置37℃培养箱培养。
经18—24h培养观察细菌生长情况。有一些生化管则需要加试剂后观察其颜色变化，做好实验结果记录并记录抑菌圈大小。
thankyou
最新名师培训视频6千集，管理文档8千份。QQ1589505898