文档介绍：紫外分光光度法与紫外分光光度计
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（优选）紫外分光光度法与紫外分光光度计
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主要内容
紫外可见光谱法应用及其发展
用好紫外可见分光光度计
紫外可见光分光光度计的选购体会
第）优点:结构较简单,价格较便宜，光度准确度等指标较单光束仪器好。
3. 双光束：二束光，二只比色皿，一只或二只光电转换器（以一只光电转换器常见）如1810D系列和19系列
优点:光度准确度等主要技术指标好,分析准确度高
缺点:结构复杂，价格较贵。——主流技术
：采用两个单色器
优点：主要适用于试样的多组分测量。——已经很少见
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单光束
双光束
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近十年来，紫外/可见分光技术变化不大，始终没有革命性的突破。然而，随着光学设计、电子技术和软件的进步，使得仪器的复杂性降低，可靠性和分析效能提高，这些都说明传统仪器也在不断发展。
高性能新器件的发展，例如氙灯光源、CCD/PDA检测器、光纤探头附件
仪器新进展
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目前国际上的高档紫外仪器：
PE lamda 900/950 （. 7×10－7，N ± （P-P））
热电 Evolution 300 （. 8×10－7，N ± （P-P））
Varian Cary 5000i （ . 5×10－7，N ± （P-P））
日立 U-3200（. 5×10－6，N×）
U-3400（. 1×10，N×）
岛津 UV-3101PC（. 1×10－6，N×）
UV-2401PC（. ×10－4，N×）
北京普析通用
TU-1901（. 1×10－4，N ± 00035A（P-P））
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国际高档紫外可见分光光度计发展向5个方向追求：（1）更低的杂散光（2）更小的仪器噪声（3）向小型化、专业化发展（4）附件的开发与发展（5）向短波、长波扩展 175～3300nm
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（1）杂散光
定义：单色器额定通带以外的透射辐射能量与总的透射能量之比，也就是光谱通带以外“不要的”光通量就是杂散光。
测定方法：标准滤色片法或NaI(220nm)、NaNO2(340nm)溶液。
重要性：是分析误差的主要来源之一，它直接限制了被分析测试样品浓度的上限
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杂散光与吸光度相对误差
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例：如对某生物酶检测：，要求1%误差；.=%（），行不行？
不行！%！.=%（），才可达1%！
杂散光的影响，会使分析测试的结果偏离比尔定律
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杂散光对测量线性的影响
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实验技巧
因为杂散光强度在边缘波段比较大，所以在波长小于220nm测试时，必须认真检查有无“假峰”出现。
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定义：一种随时间而变化、但又是随机的输出信号。
测定方法：开机预热、500nm处时间扫描120秒，测定P-P值，注意不是RMS值！
主要来源：光学系统、光源、检测器、电子元器件及电路设计等。
重要性：是分析误差的主要来源之一，它直接限制了被分析测试样品浓度的下限。
（2）噪声
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噪声与吸光度相对误差和吸光度真值的关系
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例如，某紫外可见风光光度计的噪声N=，。则△A/A0=×100%=2%即由仪器噪声引起的相对误差则达到2%
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水平比较表
厂商
型号
Photometric
Accuracy(光度准确度)
Stray Light（杂散光）
Photometric
Noise
（噪声）
Draft（基线漂移）
Baseline Flatness（基线平直度）
日本ShimadzuUV-310PC
＋
(0-)
＋
(-1A)
+%T
%
(220nm)
%
(340nm)
Not Listed

2H后
±
(210-800nm) SBW 2nm