文档介绍：生物化学实验报告
姓名：

学号：

专业年级：

组别：
生物化学与分子生物学实验教学中心
生物化学实验报告
姓名：

学号：

专业年级：

组别：
生物化学与分子生物学实验教学中心
实验名称
血清总蛋白测定〔双缩脲试剂法〕
实验日期
2021-11-21
实验地点
第五实验室
合作者
指导老师
评分
教师签名
批改日期
一、实验目的
1、掌握双缩脲测定血清总蛋白的根本原理、操作；
2、熟悉血清总蛋白的临床意义；
3、了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和本卷须知。
二、实验原理
〔一〕：双缩脲反响
在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反响叫做双缩脲反响。两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲〔H2N-OC-NH-CO-NH2〕，因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反响，生成紫红色络合物；蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键〔-CO-NH-〕，同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反响，生成的紫红色络合物，且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好的线性关系。
材料与方法：
实验材料
样品：大牛血清
试剂：双缩脲试剂、蛋白质标准液〔70g/L〕、生理盐水〔%〕
器材：试管、加样枪、刻度吸管、洗耳球
设备：1100分光光度计、水浴锅
实验步骤
取3支试管，做好标记(B空白对照，S标准液，U为待测大牛血清)，按下表操作：
参加物〔ml〕
B (空白〕
S 〔标准〕
U〔待测〕
大牛血清〔1：10〕
-
-

蛋白标准液〔1：10〕
-

-
%***化钠溶液

-
-
双缩脲试剂

，观察各试管颜色
℃水浴锅中加热20min，观察颜色
，置于1100分光光度计的样品槽内，在波长540nm，以空白管调零，测S和U管吸的光度。
，将比色杯中的样品回收进试管
依据公式算出结果
结果与讨论：
：实验结果
实验现象：
在实验中首先参加双缩脲试剂，%***化钠溶液、蛋白质标准液、相应的大牛血清后溶液没有明显的颜色变化，呈淡蓝色透明状；
水浴20分钟之后，B试管试管显淡蓝色；S试管和U试管显浅紫色且S试管的颜色比U试管的颜色稍深。
2、实验数据：
管号测定次数平均吸光度
1 2 3
S