文档介绍：第41卷第2期许昌学院学报
2022年3月 One/OneCN微量核酸蛋
收稿日期：2021 -07-05
基金项目：国家量点研发计D项目（2016YFD0500704）；国家自然科学基全项目（31701689,32172300）
作者简介:孔爱华（1975—），女，山东定陶人，副主任医'，研究方向：呼吸内科方向-
通讯作者：王德国（1975—），男，山东荷泽人，教授，博士，研究方向：基因快速检测-第41卷第2期孔爱华，等：LMTU技术检测HPV核酸的可行性研究 73
白浓度测定仪，美国赛默菲世尔公司-

根据 GenBank 数据库中 HPV16 （登录号:FJ006723） & HPV18 （登录号:AY262282） &HPV35 （登录号:
HQ537722）、HPV39 （登录号：KC470249）、HPV45 （登录号：EF202162）、HPV51 （登录号：KU298904）、
HPV52"登录号:AB819274）、HPV56 （登录号：EF177181）和 HPV58 （登录号：AB819276）的基因组,通过
BLAST在线比对软件选取保守序列，并使用Oligo 7软件（美国MoIpuIst Biolooy Insights有限公司），选取
LMTI方法所要求的溶解温度曲线呈人字梯型、半人字梯型、直梯型的靶序列⑶，引物序列如表1所示-
并且这些靶序列满足LMTU方法的另外两个要求:GC含量为40%〜80%；序列特异性髙.
表1高危型HPV病毒的靶序列筛选与LMTIA引物设计
病毒靶序列 Tm曲线 LMTIA引物
GTGGCCATCCTTTATTAAATA
P AGCATTTTCTGTGTCATTTTGTGGCCATCCTTTATTAAA
AATTGGATGACACAGAAAAT 人字梯型
HPV16
GCTAGTGCTTATGCAGCAAA （内引物重叠）