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特殊染色(结缔组织染色).docx

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特殊染色(结缔组织染色).docx

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特殊染色(结缔组织染色).docx

文档介绍

文档介绍:---特染:结缔组织染色
wanliheng 丁香园版主
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粉丝加关注. 2009-04-19 11:38 消息 引用 收藏 分享
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胶麻纤维具有韧性大,抗拉力强的特
点。在弱酸或沸水中可慢慢溶化成胶水,称白明胶。胶原纤维和网状纤维的基本构造相似,
都以胶原单位(蛋白质为主的大分子)为基本单位。 胶原单位接连和融合形成网状纤维;它是粗
约1科m左右的分支状纤维,形成全身组织的支架,在 HE染色中看不清楚。但其外面裹着
的一层类蛋白,凭借镀银法可以清楚地显示出来,故又称为嗜银纤维。
胶原纤维单位主要由纤维母细胞合成。 其他如平滑肌细胞等也能产生。 胶原单位的形成开始
于细胞的粗面内质网,合成比构成胶原单位的“肽链更长的前a肽链,经高尔基体分泌出细
胞,在细胞外液的内切肽酶作用下,切去前a肽链的附加肽段而形成胶原单位;再经细胞外
液的赖氨酰氧化酶作用使两条肽链通过醛醇或醛***缩合构成共价交联。 这样胶原单位分子之
间就形成了稳定的联系,形成胶原微纤维,然后再聚合而成胶原纤维。
二、胶原纤维染色的应用
胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭形、 纤维形细胞肿瘤的组织来源: 常常要在纤维、
平滑肌和神经三者之中作出选择。还能使用于其他的情况下,如观察动脉硬化的心脏,在
HE 切片中,心肌内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色,而作胶原纤维染色可将胶原组织
和心肌组织明显地区分开来。 早期肝硬化用胶原纤维染色, 也可使小叶之间少量增生的胶原
纤维突出地显示出来。 由干胶原纤维是由成纤维细胞产生的一种纤维蛋白成分, 常常被酸性
染料染色。
l. Van Gieson 苦味酸酸性复红法(1889 年)
[ 试剂配制 ]
(l) Van Gieson液1%酸性品红水溶液10ml,苦味酸饱和水溶液(%)90ml。
(2)Weigert铁苏木素溶液甲液:苏木素1g,95%或无水乙醇100ml;乙液:29%三***化铁水溶
液 4ml ,蒸馏水 95ml ,盐酸 l ml 。
临用时取甲液和乙液等量混合即可。 铁苏木素不能像明矾苏木素一样配制后放置, 因铁与染
色剂的色素可引起化合而形成不溶性沉淀。 所以, 以铁作为媒染液时, 必须与染液分别配制、
分别应用或临时混合应用。
[ 染色方法 ]
(1)组织固定于10%甲醛液,常规脱水包埋。
(2)组织切片脱蜡至水。
用 Weigert 苏木素液染5~l0min 。
自来水冲洗数分钟。
(5)%盐酸乙醇分化。
自来水洗至变蓝;用蒸馏水洗。
(7)用 Van Gieson 液染 1~5min 。
倾去染液,直接用95% 乙醇分化和脱水。
无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
[ 结果 ] 胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞黄色,胞核呈黑色。
[ 注意事项 ]
(1) 目前以苦味酸、复红的 Van Gieson 染液直接染此一种溶液即可。
(2)Weigert 铁苏木素分甲、乙两液,应于临用前将两液等量混合使用,而不宜预先混合,否
则易氧化沉淀而逐渐失其染色能力。
(3) Van Gieson 染色液分别在临用时混合,防止放置时间长,则酸性品红不易着色。
Siriured 染色法
这种方法可使胶原纤维长期保存,是不易褪色的一种好方法。
[ 试剂配制 ]
(l)Siriusred %Siriured l0ml ,苦味酸饱和液90ml 。
(2)天青石蓝液 天青石蓝B1?25g,,蒸储水250m1。
溶解煮沸,待冷过滤后,加入甘油 30m1 ,然后再加入浓盐酸5ml 。
[ 染色方法 ]
(1)组织固定于10%甲醛液,常规脱水包埋。
切片脱蜡至水。
(3)入天青石蓝液染5~10min ,
蒸馏水洗多次。
(5)Siriured 饱和苦味酸液染15~30min 。
无水乙醇直接分化与脱水。
(7)二甲苯透明,中性树胶封固。
[ 结果 ] 胶原纤维呈鲜红色,细胞核绿色,其他为黄色。
Lillie 改良 Van Gieson 法(1965年)
[ 试剂配制 ]
用 1%%快绿FCF 液,或为得到较蓝的绿色用3%毛绿S(Wool greenS )。
且 %酸性复红,%紫*** (Violamine) 或用 %~%丽春红 S(ponceau S) 溶于饱和的
苦味酸水溶液。
[ 染色方法 ]
(1) 按常规将切片脱蜡至水。
(2)用 Harris 明矾苏木素液染3min 。
自来水洗,盐酸乙醇分